化濁解毒法對慢性萎縮性胃炎癌前病變相關基因和血管生成機制影響的研究.pdf

1、第一部分 CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌變多階段中的表達及相關性
　　 目的:采用免疫組化法探討癌基因細胞周期蛋白D1(Hormone of cellcycle D1,CyclinD1)和抑癌基因張力蛋白同源染色體缺失磷酸酯酶(Phosphate and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在胃黏膜癌變多階段中的表達及相關性,為進一步研究胃癌的發(fā)生機制提供理論基礎,

2、為胃癌的早期診斷提供實驗室依據,也為中西醫(yī)的結合找到切合點。
　　 方法:選擇河北醫(yī)科大學中醫(yī)院臨床病理科保存的2004年-2008年胃竇部病理活檢組織存檔蠟塊,共223例。其中胃癌組織標本均未經放射治療和(或)化學治療。應用免疫組織化學染色法檢測CyclinD1和PTEN在不同胃黏膜病變石蠟包埋標本的表達及相關性。
　　 結果:
　　 1.在慢性淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生、不典型增生和胃癌中Cycl

3、inD1的表達率逐漸增高,PTEN的表達率逐漸降低,均有統計學意義(P＜0.05)。
　　 2.CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌變多階段中的陽性表達率呈負相關。
　　 結論:
　　 1.隨著胃黏膜癌變的階段性進展,CyclinD1蛋白表達的陽性率越來越大;PTEN蛋白表達的陽性率越來越小。
　　 2.隨著胃黏膜癌變的階段性進展,CyclinD1蛋白和PTEN蛋白表達有關聯性,密切程度中等,隨著Cycl

4、inD1蛋白表達增加PTEN蛋白表達減小。
　　 第二部分化濁解毒和胃方對慢性萎縮性胃炎胃癌前病變的療效觀察
　　 目的:觀察以“濁毒”理論組方的化濁解毒和胃方對慢性萎縮性胃炎(CAG)癌前病變的治療作用。
　　 方法:將110例CAG癌前病變患者隨機分為兩組,治療組(55例)給予化濁解毒和胃方口服,對照組(55例)給予維甲酸口服,療程均為6個月。觀察兩組患者臨床內鏡、病理療效及治療前后CyclinD1和PTEN

5、表達積分值的變化。
　　 結果:胃鏡下治療組對黏膜白相和膽汁反流的改善優(yōu)于對照組,病理療效變化比較顯示,治療組較對照組治愈率高,免疫組化結果顯示,化濁解毒和胃方能顯著抑制CyclinD1的表達,升高PTEN的表達,有顯著性差異,具有統計學意義(P＜0.05)。
　　 結論:
　　 1.化濁解毒和胃方能減輕患者胃黏膜充血、水腫、糜爛,緩解黏膜白相、顆粒增生、膽汁反流等胃鏡征象。
　　 2.化濁解毒和胃方能提

6、高患者IM、ATP等不同病理分型的治愈率。
　　 3.化濁解毒和胃方能抑制各階段胃黏膜CyclinD1蛋白的表達、增強PTEN蛋白的表達,抑制細胞增殖、促進細胞凋亡,從而恢復細胞增殖與凋亡間的平衡狀態(tài)。
　　 第三部分化濁解毒和胃方對胃癌前病變大鼠胃癌相關基因的影響
　　 目的:觀察化濁解毒和胃方對慢性萎縮性胃炎癌前病變大鼠胃黏膜細胞周期蛋白D1及張力蛋白同源染色體缺失磷酸酯酶基因Mrna表達的影響。
　　

7、 方法:Wistar大鼠66只隨機分為6組,每組11只:正常對照組(空白組)、模型組、維甲酸治療組(維甲酸組)、化濁解毒和胃方高劑量治療組(高劑量組)、化濁解毒和胃方中劑量治療組(中劑量組)、化濁解毒和胃方低劑量治療組(低劑量組)。采用幽門彈簧插入復合法復制CAG癌前病變模型,造模成功后,各組給予相應的藥物每天灌胃1次,每次2mL,連續(xù)12周然后用基因的反轉錄(RT)和聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合(RT-PCR)檢測癌前病變大鼠胃黏

8、膜CyclinD1及PTENmRNA表達。
　　 結果:與空白組比較,模型組CyclinD1mRNA的表達增高,PTENmRNA表達降低,差異有統計學意義(P＜0.05);各治療組與模型組比較,差異有統計學意義(P＜0.05);高劑量組與維甲酸組降低CyclinD1mRNA,增高PTENmRNA的表達優(yōu)于中藥中、低劑量組(P＜0.05)。
　　 結論:
　　 1.化濁解毒和胃方能使實驗性慢性萎縮性胃炎大鼠的飲食、

9、活動、精神狀態(tài)、毛發(fā)、攝食、大便以及體重等方面得到大體改善。
　　 2.化濁解毒和胃方能改善實驗性慢性萎縮性胃炎大鼠的病理改變。
　　 3.化濁解毒和胃方能降低CyclinD1mRNA的表達,明顯增高PTENmRNA表達。
　　 4.“以方測證”驗證慢性萎縮性胃炎癌前病變中CyclinD1mRNA、PTENmRNA可能是“濁毒”在基因方面的物質表達。
　　 第四部分化濁解毒和胃方對胃癌前病變大鼠血管生成機

10、制的影響
　　 目的:本研究以方測證,觀察化濁解毒和胃方對慢性萎縮性胃炎胃癌前病變大鼠胃黏膜組織缺氧誘導因子1α(hypoxia induciblefactor-1α,HIF-1α)、血管內皮生長因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)的影響,探討化濁解毒對慢性萎縮性胃炎癌前病變血管新生方面的可能治療機制。
　　 方法:Wistar大鼠66只隨機分為6組,每組11只:正常對照組

11、(空白組)、模型組、維甲酸治療組(維甲酸組)、化濁解毒和胃方高劑量治療組(高劑量組)、化濁解毒和胃方中劑量治療組(中劑量組)、化濁解毒和胃方低劑量治療組(低劑量組)。采用幽門彈簧插入復合法復制CAG癌前病變模型,各組給予相應的藥物每天灌胃1次,每次2mL,連續(xù)12周。然后采用免疫組織化學和western-blot的方法,觀察化濁解毒和胃方對慢性萎縮性胃炎胃癌前病變大鼠胃黏膜組織VEGF、HIF-1α的影響
　　 結果:與空白組比

12、較,模型組及各治療組VEGF、HIF-1α的表達增高,差異有統計學意義(P＜0.05);各治療組與模型組比較,差異有統計學意義(P＜0.05);高劑量組與中劑量組降低VEGF、HIF-1α的表達優(yōu)于維甲酸組、低劑量組(P＜0.05),低劑量組與維甲酸組比較差異無統計學意義(P＞0.05)。
　　 結論:
　　 1.化濁解毒和胃方能降低胃癌前病變大鼠胃黏膜HIF-1α、VEGF的表達。
　　 2.“以方測證”驗證慢