非小細(xì)胞肺癌的表現(xiàn)遺傳學(xué)治療對(duì)DNMT1表達(dá)的影響.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩59頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:探討表觀治療對(duì)非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)DNMT1表達(dá)的影響特點(diǎn)及生物學(xué)作用。
  方法:本研究分為兩部分。第一部分:表觀治療對(duì)NSCLC中DNMT1的影響及作用機(jī)制的研究:1.表觀治療對(duì)NSCLC中DNMT1表達(dá)的影響。非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞分為對(duì)照組(未用藥)、5-AZA-CDR治療組(1~3天)、MS-275治療組(第4天)及混合治療組(第1~3天,5-AZA-CDR;第4天,MS-275),治療后收集細(xì)胞,提取蛋白通過We

2、sternblotting技術(shù)對(duì)DNMT1表達(dá)進(jìn)行分析;2.表觀治療抑制DNMT1表達(dá)的作用機(jī)制,按照第一部分治療方案收集細(xì)胞樣本,提取總RNA,進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,然后進(jìn)行qRT-PCR分析。
  第二部分:表觀治療的用藥濃度及治療后非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中DNMT1變化的研究。1.表觀治療藥物治療NSCLC的最佳用藥濃度的探究:對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞分為對(duì)照組(未用藥)、5-AZA-CDR治療組(1~3天)、MS-275治療組(第4

3、天)及混合治療組(第1~3天,5-AZA-CDR;第4天,MS-275),加入不同濃度的藥物,通過MTT及Westernblotting技術(shù)探索治療非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的最佳用藥濃度;2.表觀治療結(jié)束后非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中DNMT1表達(dá)的變化。表觀治療后,收集停藥后不同時(shí)間段的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,進(jìn)行Westernblotting分析,來檢測(cè)停藥后DNMT1在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中表達(dá)的變化。
  結(jié)果:第一部分:1.表觀治療后,治療組DNM

4、T1表達(dá)水平均低于未治療組,聯(lián)合治療組較5-AZA-CDR治療組有效,而5-AZA-CDR治療組比MS-275治療組效果明顯;2.通過qRT-PCR研究證明了DNMT1生成減少是其在細(xì)胞中表達(dá)降低的主要原因。
  第二部分研究發(fā)現(xiàn),表觀治療藥物如果藥物濃度過小對(duì)DNMT1抑制效果不明顯,若用量過大則會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性;表觀治療結(jié)束時(shí)對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中DNMT1的抑制作用最強(qiáng),但隨著停藥時(shí)間的延長,DNMT1表達(dá)水平有所恢復(fù);而且不同

5、細(xì)胞株對(duì)表觀治療的敏感性不同。
  結(jié)論
  1.表觀治療能有效抑制NSCLC中DNMT1基因的表達(dá),而且對(duì)NSCLC生長有抑制作用,并能誘導(dǎo)其死亡。DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-AZA-CDR對(duì)DNMT1的抑制作用較去乙酰化酶抑制劑MS-275直接有效,聯(lián)合用藥效果更佳。表觀藥物對(duì)DNMT1的抑制作用主要體現(xiàn)在阻礙其生成。
  2.表觀治療藥物如果藥物濃度過小對(duì)抑制DNMT1效果不明顯,若用量過大則會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性,而且

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論