清肝方對ConA及CCl-,4-誘導(dǎo)的肝損傷小鼠干預(yù)作用及機制的研究.pdf

1、實驗?zāi)康?br>　　 探討以清熱利濕法為代表的清肝方對ConA誘導(dǎo)的免疫性肝損傷小鼠,及CCl4誘導(dǎo)的化學(xué)性肝損傷小鼠的干預(yù)作用,并進(jìn)一步探討內(nèi)在的免疫調(diào)節(jié)作用機制。實驗材料和方法
　　 第一部分,46只ICR雄性小鼠隨機分成A(清肝方組)、B(清肝方加豬苓多糖腹腔注射組)、C(模型組)、D(正常對照組)四組。前三天,各組分別預(yù)治療,其中,A組予清肝方灌胃,B組予清肝方灌胃加腹腔注射豬苓多糖溶液,C、D組予蒸餾水灌胃,每日兩次

2、,共計5次,于末次給藥后1h,采用0.2％的ConA溶液予小鼠尾靜脈注射造模,分別于2h檢測血清TNF—α,8h檢測血清IFN—γ、IL-4,10h應(yīng)用改良賴氏法檢測血清中轉(zhuǎn)氨酶的水平,并觀察肝、脾指數(shù)及病理變化情況。
　　 第二部分,40只ICR小鼠隨機分成A、B、C和D4組:A(清肝方組)、B(清肝方加豬苓多糖腹腔注射組)、C(模型組)、D(正常對照組)。前兩天,其中A組小鼠給予清肝方灌胃,B組小鼠予清肝方灌胃加腹腔注射豬苓

3、多糖溶液,C組、D組小鼠予蒸餾水灌胃,第三天,A、B、C三組給予CCl4溶液腹腔注射造模,D組予等體積食用油造模,同時繼續(xù)給藥,于造模后48h摘眼球取血,檢測血清ALT、AST水平。
　　 實驗結(jié)果
　　 ①ConA20mg/kg尾靜脈注射后10h,清肝方灌胃組、清肝方灌胃協(xié)同豬苓多糖腹腔注射組、正常對照組三者之間血清ALT水平分別為141.87±71.94,106.36±34.31,85.17±23.08,三者之間無明

4、顯差異,但明顯低于ConA模型組(448.30±110.10)(p<0.01&p<0.05)；正常對照組血清AST水平低于其它三組(p<0.01),清肝方協(xié)同豬苓多糖腹腔注射組血清AST明顯低于ConA模型組(p<0.01)。
　　 ②肝臟病理HE染色顯示:模型組中央靜脈旁肝細(xì)胞嚴(yán)重水腫,肝細(xì)胞發(fā)生水樣變性壞死,同時有大量淋巴細(xì)胞浸潤,局部出現(xiàn)點灶狀壞死,肝索斷裂。而給予清肝方及清肝方協(xié)同豬苓多糖注射組則病理改變不明顯。

5、　　 ③ConA注射8h后,中藥治療組IFN—γ的水平(638.68±212.87、549.95±173.74)明顯高于正常組(12.78±1.59)(P<0.01)和模型組(336.25±85.84)(P<0.05),IL-4水平(5.22±1.80、4.87±2.43)則高于正常組(1.30±0.61)(P<0.01),低于模型組(7.50±2.64)(P<0.05)。
　　 ④ConA注射2h后,中藥治療組TNF-α水平

6、(180.72±37.29、183.79±51.08)低于模型組(292.82±63.96)(P<0.05),高于正常組(11.20±10.91)(p<0.01)。
　　 ⑤CCl4腹腔注射48h后,血清中ALT水平明顯高于正常組(55.62±19.80)(p<0.01),提示造模比較成功；清肝方(97.38±72.64)及清肝方加豬苓多糖腹腔注射組(117.67±35.42)血清ALT水平低于模型組(188.93±51.25)

7、(p<0.05,p<0.01),而AST水平未有明顯差異。
　　 實驗結(jié)論
　　 ①清肝方能夠降低ConA誘導(dǎo)的免疫性肝損傷小鼠血清中ALT、AST水平,提示清肝方在免疫性肝損傷中,具有保肝降酶的作用。
　　 ②清肝方能夠降低血清IL-4、TNF-α水平,提高IFN—γ含量,提示清肝方能夠促使Th1/Th2平衡向Thl方向漂移,增強細(xì)胞免疫,有利于更有效的清除入侵體內(nèi)的病原體。
　　 ③清肝方能夠降低CC