IFNα-2a對(duì)CCl4誘導(dǎo)肝纖維化的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：觀察IFNα-2a對(duì)CCl4誘導(dǎo)肝纖維化的作用及影響因素；并探討IFNα-2α阻斷CCl4誘導(dǎo)肝纖維化的凋亡機(jī)制。
　　 方法：建立CCl4誘導(dǎo)肝纖維化模型，采用隨機(jī)對(duì)照原則將SD大鼠分成5組，每組10只，即生理鹽水對(duì)照組(A組)、纖維化模型組(B組)、6萬U/Kg IFNα-2a干預(yù)組(C組)、12萬U/Kg IFNα-2a干預(yù)組(D組)及6萬U/Kg IFNα-2a對(duì)照組(E組)。造模8周時(shí)采集血標(biāo)本及肝組織標(biāo)本，分別

2、進(jìn)行肝功能ALT、AST、TBIL、TP指標(biāo)，肝纖維化指標(biāo)HA、LN、PCⅢ檢測(cè)，及組織病理形態(tài)學(xué)：HE染色、Masson染色和網(wǎng)狀纖維染色檢測(cè)。半定量RT-PCR分析肝組織Bcl-2、Bax基因的表達(dá)情況，TUNEL檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡情況，并采用免疫組化法用a-SMA對(duì)活化的肝星狀細(xì)胞(HSC)進(jìn)行標(biāo)記。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，進(jìn)行方差分析。
　　 結(jié)果：(1)血清學(xué)檢測(cè)：A、B、C、D組各組之間的肝功能指標(biāo)ALT

3、、AST、TBIL均有顯著差異性(P<0.01)，B組顯著高于A組，C、D組顯著低于B組(P<0.05)，D組顯著低于C組(P<0.05)，對(duì)照組A、E組之間無差異(P>0.05)；TP各組之間無差異，(P>0.05)。肝纖指標(biāo)HA：B組顯著高于A組，B組低于C組(P<0.05)，D組與A、E組之間無顯著差異(P>0.05)；LN各實(shí)驗(yàn)組之間均有顯著性差異(P<0.01)。組織病理：HE染色、Masson染色和網(wǎng)狀纖維染色均顯示C、D組

4、肝組織炎癥及肝纖維化程度較B組顯著減輕，D組較C組肝纖維化程度更輕，A、E組肝組織未見炎癥及纖維化。
　　 (2)半定量RT-PCR結(jié)果：Bcl-2基因的表達(dá)，各組均值之間存在差異，其表達(dá)量為B組(0.827±0.001)最高，E組(0.785±0.001)最低，C組(0.813±0.002)、D組(0.796±0.001)，A組(0.790±0.001)介于B、E組之間。Bax基因的表達(dá)各組均值之間也存在差異，其表達(dá)量高低次序

5、與Bcl-2的表達(dá)相反，分別為A組(1.060±0.003)、D組(0.916±0.002)、C組(0.899±0.003)、B組(0.839±0.003)、E組(1.055±0.001)。TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)：各實(shí)驗(yàn)組的肝細(xì)胞凋亡指數(shù)存在顯著差異(P<0.01)，分別為：A組(6.98±1.19)％、B組(57.53±2.21)％、C組(39.56±1.17)％、D組(24.76±0.96)％、E組(8.61±1.14)％，IFNα

6、-2a干預(yù)組(C、D組)的肝細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著低于纖維化模型組(B組)(P<0.05)，對(duì)照組(A、E組)顯著低于IFNα-2a干預(yù)組(C、D組)，且IFNα-2a干預(yù)組D組顯著低于C組(P<0.05)。經(jīng)a-SMA標(biāo)記活化肝星狀細(xì)胞的免疫組化：肝纖維化模型組(B組)有大量a-SMA陽(yáng)性表達(dá)，IFNα-2a干預(yù)組C組a-SMA陽(yáng)性表達(dá)較B組減少，D組更少，A、E組未見a-SMA陽(yáng)性表達(dá)。
　　 結(jié)論：(1)IFNα-2a能夠阻斷C