枸杞多糖對CCl4誘導的大鼠肝纖維化的保護作用及機制研究.pdf

1、肝纖維化(Hepatic fibrosis)是許多慢性肝病的共同病理基礎，多種細胞因子、生長因子、基質及其降解酶類等均參與了肝纖維化的發(fā)生與發(fā)展。我國肝纖維化發(fā)病率越來越高，嚴重地威脅著寵物和人的健康。有研究證實，肝纖維化是一個可逆的病理過程，如果能在肝纖維化發(fā)病早期進行適當有效的治療不僅能夠阻止病情的惡化，甚至還可以逆轉肝臟纖維化。因此尋求防治肝纖維化的有效藥物具有重大的意義。枸杞多糖（Lycium barbarum polysacc

2、harides，LBP）是我國傳統(tǒng)中藥枸杞的重要活性成分，具有多方面的藥理作用，能有效提高機體抗氧化物的活性、清除過多的自由基并調節(jié)機體免疫等。有研究表明，LBP能有效緩解大鼠的肝臟毒性，然而具體的緩解機制還鮮有報道。
　　本試驗在之前的研究基礎上，采用四氯化碳(Carbon tetrachloride，CCl4)建立肝纖維化大鼠模型，研究了LBP對CCl4誘導的大鼠肝纖維化的保護作用，并進一步探討其具體保護機制，主要研究內容如下

3、:
　　試驗一.枸杞多糖對CCl4誘導的大鼠肝纖維化的保護作用
　　50只Wistar大鼠隨機分為5組，每組10只，即空白對照組、CCl4模型組、LBP低劑量組、LBP中劑量組和LBP高劑量組。除空白對照組之外，所有大鼠用40％的CCl4橄欖油溶液灌胃，2 mL/kg每周兩次，持續(xù)八周誘導大鼠肝纖維化。LBP組是在模型組基礎上分別用400mg/kg、800mg/kg、1600mg/kg的LBP灌胃大鼠，每日一次，持續(xù)八周。實

4、驗結束后，觀察LBP對大鼠生長性能、血清ALT、AST和ALP活性、肝組織病理變化及大鼠肝臟中TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ表達的影響。結果表明:LBP能有效改善模型組大鼠的精神狀態(tài)及生長狀況，升高其體重的增量并降低肝重和肝指數(shù)(P＜0.05)，LBP能明顯降低CCl4誘導的大鼠血清中ALT、AST及ALP含量的升高（P＜0.05）及肝纖維化病理損傷，LBP還能顯著降低肝纖維化大鼠肝臟中TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ的mRN

5、A表達，中、高劑量LBP的緩解作用更顯著。這些結果表明:LBP能有效緩解CCl4誘導的大鼠肝損傷。
　　試驗二.枸杞多糖緩解CCl4誘導的大鼠肝纖維化的機制研究
　　為了探究LBP緩解CCl4誘導的大鼠肝纖維化的具體機制，50只Wistar大鼠，隨機分為5組，每組10只，試驗分組同試驗一，我們首先測定了大鼠肝臟中SOD、GSH-Px、GSH和MDA的含量。結果表明:與空白對照組相比，CCl4明顯地降低了大鼠肝臟中SOD、GS

6、H-Px和GSH的活性(P＜0.05)，顯著地升高了MDA的含量（P＜0.05），與CCl4處理組相比，400 mg/kg、800 mg/kg、1600 mg/kg LBP能有效提高纖維化大鼠肝臟中SOD、GSH-Px和GSH的活性，并顯著降低MDA的含量(P＜0.05)，這些結果表明:LBP能顯著提高肝纖維化大鼠體內抗氧化物的活性并抑制脂質過氧化。
　　隨后我們進一步測定大鼠肝臟中炎癥因子TNF-α、IL-1β、MCP-1及TL

7、Rs/NF-κB通路相關分子TLR2、TLR4、MyD88和NF-κB的表達。結果表明:與空白對照組相比，CCl4能顯著升高大鼠肝臟中炎癥因子TNF-α、IL-1β和MCP-1mRNA的表達水平(P＜0.05)，這說明CCl4能促進機體的炎癥反應，與CCl4模型組相比，LBP-顯著降低了CCl4誘導的炎癥因子的表達，其中中、高劑量LBP的緩解效果更顯著（P＜0.05）。除此之外，與空白組中健康大鼠相比，三種劑量的LBP均能顯著降低CCl