鮑曼不動(dòng)桿菌耐碳青霉烯類抗生素耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　 由耐碳青霉烯類多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌引起的嚴(yán)重院內(nèi)感染近年呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，使臨床醫(yī)生面臨巨大的挑戰(zhàn)，對(duì)其耐藥機(jī)制的研究成為了一個(gè)重要的課題。本研究調(diào)查分析某綜合性醫(yī)院2007年1月到2009年12月間鮑曼不動(dòng)桿菌在臨床送檢標(biāo)本中的分離趨勢(shì)及其對(duì)抗菌藥物的耐藥性，指導(dǎo)醫(yī)生合理使用抗菌藥物，以克服或減少細(xì)菌耐藥性的出現(xiàn)或傳播。同時(shí)，采用分子生物學(xué)方法研究鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥在醫(yī)院的主要耐藥機(jī)制。

2、　　 方法：
　　 1、從某綜合性醫(yī)院(三級(jí)甲等)實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選出2007年1月到2009年12月3年臨床標(biāo)本所分離的鮑曼不動(dòng)桿菌詳細(xì)資料，應(yīng)用WHONET5.4軟件對(duì)其分離情況及藥敏進(jìn)行比對(duì)分析。
　　 2、隨機(jī)選取2008年1月～2009年9月期間分離的100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌(非重復(fù)菌株)，應(yīng)用VITEK-2compact全自動(dòng)微生物鑒定藥敏系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)，并用紙片擴(kuò)散法(K-B法)進(jìn)行

3、藥敏確認(rèn)試驗(yàn)，結(jié)果判讀采用相應(yīng)年份的CLSI(美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì))標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。
　　 3、對(duì)100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌利用VITEK-2Compact的高級(jí)專家系統(tǒng)軟件(AESTM)進(jìn)行耐藥機(jī)制(產(chǎn)碳青霉烯酶)初篩。
　　 4、設(shè)計(jì)合成針對(duì)blaIMP、blaVIM、blaSIM-1blaOXA-23和blaOXA-24的引物序列，采用PCR方法對(duì)100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行特異性擴(kuò)增，并對(duì)PCR產(chǎn)

4、物進(jìn)行DNA測(cè)序分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、某綜合性醫(yī)院在2007～2009年3年間分離的鮑曼不動(dòng)桿菌分別為238株、317株和403株，占同年病原菌分離率的4.820％、5.5％、7.2％，該細(xì)菌分離率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)；在14種常規(guī)測(cè)試的抗菌藥物中，該菌對(duì)IMP的耐藥率最低，分別為10.3％、24.5％、43.0％，其次是TZP(16.3％、28.6％、44.4％)和FEP(24.8％、37.4％、47.8％)，對(duì)其余

5、11種抗菌藥物耐藥率維持在一個(gè)較高的水平，耐藥率在45.1％～75.7％之間。
　　 2、隨機(jī)篩選的100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌主要分離自痰標(biāo)本(80％)，病區(qū)分布則主要集中在ICU(62％)，其次是高干保健病區(qū)(13％)；該類細(xì)菌對(duì)7類抗假單胞菌的抗生素耐藥譜顯示，多重耐藥菌株占98％，泛耐藥菌株占72％，對(duì)13種常規(guī)測(cè)試抗菌藥物的耐藥率都在85％以上。
　　 3、VITEK-2Compact的高級(jí)專家軟件系統(tǒng)(

6、AESTM)顯示為產(chǎn)碳青霉烯酶的100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌，經(jīng)PCR特異性擴(kuò)增，結(jié)果顯示：用引物blaIMP、blaVIM、blaSIM-1、和blaOXA-24均未檢測(cè)到陽(yáng)性結(jié)果，提示在本次研究的鮑曼不動(dòng)桿菌中，不產(chǎn)生IMP、VIM、SIM-1和OXA-24型碳青霉烯酶；有79株鮑曼不動(dòng)桿菌用引物blaOXA-23擴(kuò)增出陽(yáng)性條帶(目的片段長(zhǎng)度為1058bp)，并且分別選取2008年及2009年各1株細(xì)菌的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，與

7、GenBank上已知序列比對(duì)，顯示均為產(chǎn)OXA-23型碳青霉烯酶鮑曼不動(dòng)桿菌。
　　 結(jié)論：
　　 1、某綜合性醫(yī)院2007～2009年3年間流行的鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥情況嚴(yán)重，其中對(duì)亞胺培南的耐藥率維持在較高水平，且呈逐年上升的趨勢(shì)。
　　 2、碳青霉烯類耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)13種常規(guī)試驗(yàn)的抗菌藥物耐藥嚴(yán)重，耐藥率均在85％以上，其中多重耐藥菌株為98％，泛耐株達(dá)到72％。
　　 3、該醫(yī)院碳青