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1、目的:動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)慢性髓細(xì)胞白血病慢性期(clironjc phase chronic myeloidleukemia,CML-CP)患者伊馬替尼治療過程中BCR-ABL融合基因變化,以了解CML-CP患者對(duì)伊馬替尼治療的反應(yīng)。對(duì)病人服用伊馬替尼治療期間發(fā)生繼發(fā)耐藥的耐藥機(jī)制進(jìn)行初步探討。 對(duì)象及方法:采用實(shí)時(shí)定量多聚酶鏈反應(yīng)(real time quantitative-polymerase chain reaction,RQ-P
2、CR)的方法對(duì)30例服用伊馬替尼的CML-CP患者服藥前、服藥后每三個(gè)月的110份骨髓或外周血標(biāo)本進(jìn)行了BCR-ABL融合基因mRNA水平連續(xù)監(jiān)測(cè)。并將RO-PCR結(jié)果與細(xì)胞遺傳學(xué)、骨髓象等結(jié)果對(duì)比,結(jié)合臨床表現(xiàn)進(jìn)行結(jié)果分析。對(duì)出現(xiàn)繼發(fā)耐藥的患者,采取RQ-PCR的方法,進(jìn)行MDR1基因表達(dá)水平的檢測(cè)。同時(shí)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription.polymerase chainreaction,RT-PCR)的
3、方法擴(kuò)增耐藥患者BCR-ABL融合基因,將擴(kuò)增出的片段行基因序列測(cè)定。 結(jié)果: 1、病人在服用伊馬替尼治療過程中BCR-ABL融合基因mRNA水平呈逐漸下降趨勢(shì),直至檢測(cè)不出(<10<'-5>)。5例病人在服用伊馬替尼過程中出現(xiàn)BCR-ABL融合基因mRNA水平較為明顯的波動(dòng)或維持在較高的水平。其中一例患者在增大伊馬替尼治療劑量的處理后,mRNA水平能再次降低。 2、在BCR-ABL融合基因mRNA水平出現(xiàn)明顯波
4、動(dòng)的患者中,結(jié)合臨床表現(xiàn)、服藥情況及其它相關(guān)檢查結(jié)果,能診斷為繼發(fā)耐藥的病人為P7和P12患者。 3、對(duì)兩例患者BCR-ABL水平達(dá)最高點(diǎn)及以后的各時(shí)點(diǎn)進(jìn)行突變點(diǎn)的檢測(cè),未能發(fā)現(xiàn)確切的點(diǎn)突變。對(duì)各時(shí)點(diǎn)進(jìn)行MDRI基因的定量檢測(cè),發(fā)現(xiàn)P7在增加藥物劑量以后才出現(xiàn)了多藥耐藥基因(multidrug resistancegene 1,MDRl)水平的逐漸上揚(yáng)。因此該患者的耐藥機(jī)制尚待進(jìn)一步探究。而P12患者在MDRl增高到一定水平后才
5、出現(xiàn)BCR-ABL水平的升高,我們認(rèn)為其耐藥可能與該基因的過度表達(dá)有關(guān)。 結(jié)論: 1、RQ-PCR用于臨床監(jiān)測(cè)伊馬替尼治療后CML-CP患者BCR-ABL融合基因mRNA水平能很好的掌握患者的病情變化,為調(diào)整藥物劑量及治療策略提供了依據(jù)。 2、CML-CP患者服用伊馬替尼治療能很好的抑制腫瘤細(xì)胞增殖,在對(duì)該藥有效的CML-CP病人中,繼發(fā)耐藥率很低。在服藥過程中出現(xiàn)BCR-ABL融合基因mRNA水平顯著增加,臨床
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