病理性疼痛調(diào)節(jié)的新靶點——脊髓背角糖皮質(zhì)激素受體.pdf

1、糖皮質(zhì)激素(GC)對機體內(nèi)多種組織和細胞發(fā)揮著廣泛的作用，對神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育與分化、神經(jīng)元的損傷與再生以及突觸可塑性等均有重要的調(diào)節(jié)作用。近年的研究顯示GC在傷害性信息的傳遞及病理性疼痛時中樞痛敏的的形成發(fā)展中也起著重要的作用。GC參與病理性疼痛調(diào)制的機制尚不十分清楚，現(xiàn)有的研究主要集中于脊髓背角感覺神經(jīng)元，實驗發(fā)現(xiàn)外周神經(jīng)損傷時脊髓背角感覺神經(jīng)元上糖皮質(zhì)激素受體(GR)可影響谷氨酸受體、谷氨酸轉(zhuǎn)運體以及其它一些與疼痛密切相關的神經(jīng)活性物

2、質(zhì)受體的表達與功能，從而增強脊髓背角神經(jīng)元的興奮性，促成神經(jīng)病理性痛的發(fā)生與維持。近年研究表明脊髓背角星形膠質(zhì)細胞在病理性疼痛的發(fā)生與維持中起重要作用，在外周神經(jīng)損傷、炎性痛以及癌痛模型中，均有不同程度的脊髓背角星形膠質(zhì)細胞活化。最近的研究顯示，GC參與了星形膠質(zhì)細胞活性調(diào)節(jié)，GR可通過抑制或增強星形膠質(zhì)細胞活性而參與不同的生理和病理過程。GC能否通過調(diào)節(jié)脊髓背角星形膠質(zhì)細胞功能而影響傷害性信息的傳遞及中樞痛敏的形成，尚不清楚。

3、　　 目的：觀察脊髓背角GR在神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生、發(fā)展過程中所起的調(diào)制作用；闡明GR在脊髓背角星形膠質(zhì)細胞活性調(diào)節(jié)中的作用及相應的胞內(nèi)信號傳導機制。
　　 方法：實驗所用動物為我校實驗動物中心提供的SD大鼠。
　　 (1).行為學方法熱痛閾測定
　　 (2).形態(tài)學方法免疫組織化學
　　 (3).細胞培養(yǎng)技術培養(yǎng)純化脊髓背角星形膠質(zhì)細胞
　　 (4).其他技術激光共聚焦技術測定培養(yǎng)的脊髓背角星

4、形膠質(zhì)細胞[Ca2+]i。
　　 結(jié)果：
　　 (1)CCI大鼠術后1d損傷側(cè)下肢即出現(xiàn)熱疼敏，到第14d熱疼敏仍持續(xù)存在；CCI大鼠術后損傷側(cè)L4-6節(jié)段脊髓背角GR表達顯著增加；CCI術后1-14d鞘內(nèi)給予GR拮抗劑RU38486可明顯減輕CCI所致的熱疼敏。
　　 (2)CORT孵育可導致培養(yǎng)的脊髓背角星形膠質(zhì)[Ca2+]i快速增高，且呈現(xiàn)劑量依賴性；G蛋白阻斷劑百日咳毒素(100 ng/mL)可阻斷COR

5、T所致的星形膠質(zhì)細胞[Ca2+]i升高效應，而糖皮質(zhì)激素胞漿可溶性受體拮抗劑RU38486(10μmol/L)以及蛋白質(zhì)合成抑制劑CHX(10μg/mL)對CORT的效應無影響；此外，蛋白激酶C抑制劑CHE(10μmol/L)能基本阻斷CORT的作用，而蛋白激酶A抑制劑H-89(10μmol/L)不影響CORT致星形膠質(zhì)細胞[Ca2+]i升高效應。
　　 結(jié)論：脊髓背角GR表達增加促進了CCI所致的慢性神經(jīng)痛的發(fā)生、發(fā)展，表明中