白血病中雌激素受體啟動(dòng)子CpG島甲基化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文白血病中雌激素受體啟動(dòng)子CpG島甲基化的實(shí)驗(yàn)研究姓名：姚婕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：府偉靈20090501第三軍醫(yī)大學(xué)博十學(xué)位論文結(jié)果：1MSP檢測白血病細(xì)胞株HL一60、K562、Jurkat、Molt一4、U937和THP一1ER啟動(dòng)子甲基化顯示：在六株白血病細(xì)胞株中，ERa—A，一B，C和ERp啟動(dòng)子cpG島處于甲基化狀態(tài)，但只有ERaAmRNA表達(dá)失活。25一AzaCdR處理HL60

2、、K562、Jurkat、M01t4、U937和THP1后，ERa—A，一B，—C和ERp啟動(dòng)子cpG島發(fā)生去甲基化，ERaAmRNA恢復(fù)表達(dá)。35AzacdR處理白血病細(xì)胞株后ERa蛋白表達(dá)較處理前ERa蛋白表達(dá)顯著增強(qiáng)pO01)，而5AzaCdR處理白血病細(xì)胞株后ERp蛋白表達(dá)較處理前ERp蛋白表達(dá)無明顯差異。45一AzaCdR處理白血病細(xì)胞株后細(xì)胞的活力，周期和增殖較處理前明顯下降pO01)。55一AzaCdR處理白血病細(xì)胞株后細(xì)

3、胞的凋亡較處理前明顯增加p001)。6利用MsP和RTPcR檢測40例白血病患者白細(xì)胞ERaA，一B，一c和ERD啟動(dòng)子CpG島甲基化情況和mRNA表達(dá)情況，結(jié)果ERa—A甲基化陽性率為95％，而正常人白細(xì)胞ERa—A卻沒有發(fā)生甲基化。ERa—B，—C和ERD在白血病患者白細(xì)胞和正常人白細(xì)胞中均發(fā)生甲基化。40例白血病患者白血病細(xì)胞ERa_A，B，一C和ERpmRNA表達(dá)情況，結(jié)果只有ERa—A表達(dá)缺失(95％)，而ERa—B，—c和E

4、RD表達(dá)正常。7對(duì)40例白血病人的預(yù)后情況進(jìn)行一年的追蹤后，發(fā)現(xiàn)兩例ERa—A未甲基化的女性病人對(duì)化療藥物敏感，預(yù)后良好。結(jié)論：1白血病細(xì)胞株雌激素受體兩個(gè)亞型的ERaA，一B，一C和ERp啟動(dòng)子cpG島是處于高甲基化狀態(tài)，而只有ERa—AmRNA不表達(dá)。2用5一AzaCdR處理白血病細(xì)胞株后，ERa—A，一B，_C和ERp啟動(dòng)子CpG島發(fā)生去甲基化，ERaAmRNA出現(xiàn)表達(dá)，說明ERaA啟動(dòng)子甲基化導(dǎo)致ERaAmRNA表達(dá)失活。3通過