胃癌p16基因啟動(dòng)子CpG島甲基化研究.pdf

1、目的：腫瘤抑制基因p16基因位于染色體9p21上，全長(zhǎng)8.5kb，由兩個(gè)內(nèi)含子和三個(gè)外顯子組成，因該蛋白分子量為15.8kD,故稱為p16。p16蛋白為細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白，它可以和細(xì)胞周期素D競(jìng)爭(zhēng)性地與Cdk4結(jié)合。p16基因的失活可以使p16蛋白表達(dá)受到抑制，進(jìn)而使細(xì)胞周期素D與Cdk4優(yōu)勢(shì)結(jié)合，使細(xì)胞生長(zhǎng)失去控制，細(xì)胞表型發(fā)生變化，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。對(duì)胃癌細(xì)胞株、胃癌及癌旁組織和癌前病變進(jìn)行研究，通過(guò)對(duì)p16基因啟動(dòng)子CpG島的甲基

2、化狀態(tài)和對(duì)胃癌細(xì)胞株轉(zhuǎn)錄表達(dá)的檢測(cè)，探討了甲基化與胃癌及癌前病變之間以及和其mRNA表達(dá)的關(guān)系。 方法：標(biāo)本為蘭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)鏡中心所取的內(nèi)鏡下胃癌標(biāo)本和本院外科的胃癌手術(shù)切除標(biāo)本，其中胃癌標(biāo)本31例，癌旁標(biāo)本23個(gè)．胃癌細(xì)胞株為SGC-7901和BGC-823，另有癌前病變53例和正常胃粘膜組織10例。采用甲基化特異性PC剛?cè)?MSP)檢測(cè)p16基因甲基化狀態(tài)，RT-PCR方法檢測(cè)p16基因rnRNA的表達(dá)。

3、 結(jié)果：采用MSP法對(duì)兩種細(xì)胞株BGC-823和SGC-7901的p16基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島甲基化狀態(tài)進(jìn)行的檢測(cè)其結(jié)果都為陽(yáng)性，而RT-PCR的檢測(cè)結(jié)果都為陰性．胃癌組織的甲基化率為74.1﹪(23/31)；癌旁組織的甲基化率為73.9﹪(17/23)；癌前病變的甲基化率為58.4﹪(31/53)；10例正常胃粘膜未能檢測(cè)到p16的甲基化狀態(tài)；胃癌組織中低分化癌和中/高分化癌甲基化率分別為85.7﹪(12/14)和64.7﹪(11/1