眼眶成纖維細胞局部分泌的IGF-1是甲狀腺相關(guān)眼病的致病因素.pdf

1、目的：
　　 觀察胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)在甲狀腺相關(guān)眼病(TAO)患者眼眶成纖維細胞(OF)的表達及在TAO發(fā)病機制中的作用。研究TAO患者臨床病情活動度與眼眶局部分泌和全身循環(huán)中IGF-1含量的相關(guān)性，及IGF-1在TAO發(fā)病機制中的作用。
　　 方法：
　　 取TAO患者及正常人球后結(jié)締組織，體外培養(yǎng)OF。通過共聚焦顯微鏡觀察，流式細胞儀檢測IGF-1R的表達。此外，留取18例TAO患者及16

2、例年齡性別匹配的正常人外周血，并將其中5例TAO患者和5例正常人的眼眶結(jié)締組織培養(yǎng)成纖維細胞。ELISA法測定所有TAO患者和正常人外周血總IGF-1和游離IGF-1的含量，并測定成纖維細胞培養(yǎng)基中的IGF-1含量，通過MTT生長實驗觀察生長抑素奧曲肽對其增殖的作用。定量PCR法測定成纖維細胞IGF-1的mRNA水平。
　　 結(jié)果：
　　 經(jīng)流式細胞儀測定，TAO患者的OF表達IGF-1R為72.6％±10.4，正常組的

3、IGF-1R為27.8%±10.7，兩組差異具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。共聚焦顯微鏡觀察及定量分析發(fā)現(xiàn)TAO患者OF表達IGF-1R較正常對照增多(P＜0.05)，且IGF-1R主要位于OF的細胞核周圍及細胞質(zhì)內(nèi)。在觀察的72小時內(nèi)，TAO患者和正常人體外培養(yǎng)的OF均能分泌IGF-1，且TAO患者的成纖維細胞分泌IGF-1比正常人多。IGF-1的分泌作用和成纖維細胞的生長作用均能被奧曲肽抑制。定量PCR結(jié)果顯示TAO患者成纖維

4、細胞IGF-1的mRNA水平較正常人高出兩倍，該差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且該mRNA水平的上調(diào)能被奧曲肽抑制。TAO患者血漿中總的及游離的IGF-1與正常人無明顯差異，與臨床活動度無關(guān)，但TAO患者成纖維細胞分泌的IGF-1與臨床活動度成正相關(guān)(r=0.97，P=0.017)。
　　 結(jié)論：
　　 通過流式細胞術(shù)和共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，與正常人相比，TAO患者的OF高度表IGF-1R。眼眶局部分泌的IGF