吉非替尼衍生物對膠質(zhì)瘤增殖影響的研究.pdf

1、貴陽醫(yī)學(xué)院貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士研究生屆碩士研究生論文論文吉非替尼衍生物對膠質(zhì)瘤增殖影響的研究吉非替尼衍生物對膠質(zhì)瘤增殖影響的研究1《中國圖書資料分類法》《中國圖書資料分類法》單位代碼：單位代碼：10660分類號：分類號：R739.4學(xué)號：號：S090379貴陽醫(yī)學(xué)院貴陽醫(yī)學(xué)院20122012屆碩士學(xué)位論文屆碩士學(xué)位論文吉非替尼衍生物對膠質(zhì)瘤增殖影響的吉非替尼衍生物對膠質(zhì)瘤增殖影響的研究研究研究生：劉來兵導(dǎo)師：劉健教授楊華教授年級：2

2、009級專業(yè)：外科學(xué)（神外）2012年4月15日貴陽醫(yī)學(xué)院貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士研究生屆碩士研究生論文論文吉非替尼衍生物對膠質(zhì)瘤增殖影響的研究吉非替尼衍生物對膠質(zhì)瘤增殖影響的研究3吉非替尼衍生物吉非替尼衍生物對膠質(zhì)瘤對膠質(zhì)瘤增殖增殖影響影響的研究的研究專業(yè)名稱神經(jīng)外科學(xué)研究生劉來兵導(dǎo)師劉健教授楊華教授摘要目的：目的：采用吉非替尼衍生物體外干預(yù)膠質(zhì)瘤細(xì)胞，以期為臨床治療該類疾病探索一種更有效的新的藥物。方法：方法：①手術(shù)切除膠質(zhì)瘤患者的

3、病灶組織，采用機(jī)械分離法獲取膠質(zhì)瘤細(xì)胞，通過差速貼壁、反復(fù)傳代、自然純化法純化，獲得純度高、生物性狀穩(wěn)定、增殖能力強(qiáng)的細(xì)胞株，通過免疫組化技術(shù)鑒定原代細(xì)胞及其純度；②以15種吉非替尼衍生物、吉非替尼及替莫唑胺三類藥物分別干預(yù)膠質(zhì)瘤細(xì)胞，每種藥物均以0μmolL、10μmolL、15μmolL、20μmolL、25μmolL、30μmolL共六種濃度干預(yù)腫瘤細(xì)胞后行MTT比色法測藥物抑制率；③參照MTT比色法測出的藥物抑制率，篩選抑制率較

4、高的吉非替尼衍生物藥物；④計算藥物IC50(半抑制濃度)，選擇IC50較低的吉非替尼衍生物、吉非替尼與替莫唑胺以10μmolL、20μmolL、30μmolL干預(yù)細(xì)胞后，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測腫瘤細(xì)胞的凋亡；選擇凋亡明顯的吉非替尼衍生物和吉非替尼采用蛋白印跡技術(shù)檢測藥物干預(yù)后腫瘤細(xì)胞磷酸化的表皮生長因子受體（pEGFR）含量的表達(dá)。結(jié)果：結(jié)果：①培養(yǎng)成功的原代細(xì)胞用GFAP鑒定，細(xì)胞染色為陽性，胞漿內(nèi)呈棕黃色顆粒，陽性率達(dá)93%左右；②MT

5、T比色法示細(xì)胞生長抑制率顯示：吉非替尼衍生物（LPY5、9、11號）能有效的抑制細(xì)胞的生長，抑制率依賴濃度，藥物抑制率與濃度成正相關(guān)，藥物抑制率隨濃度升高而增加；其他吉非替尼衍生物藥物抑制率與濃度不成正相關(guān)；③IC50結(jié)果：吉非替尼衍生物（LPY9號藥物）IC50低于5號藥物，兩者IC50均低于吉非替尼及替莫唑胺；吉非替尼衍生物（LPY11號藥物）IC50高于吉非替尼及替莫唑胺。④流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果：吉非替尼衍生物（LPY5、9