重組人粒細(xì)胞集落刺激因子對(duì)局灶性腦缺血保護(hù)作用機(jī)制的研究.pdf

1、本論文常用縮略詞表重組人粒細(xì)胞集落刺激因rcolonystimulatingrhGCSF骨髓基質(zhì)細(xì)胞腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子5澳2脫氧尿曹神經(jīng)膠質(zhì)兀纖維酸性蛋自神經(jīng)功能缺損評(píng)分大腦中動(dòng)脈阻斷a一微管蛋白一III神經(jīng)絲神經(jīng)元特異性烯醇化酶recombinanthumangranulocytefactorbonemarrowstromalcellsbrainderivedneurotrophicfactor5bromodeoxyuridinegl

2、ialfibrillaryacidicproteinNeurologicalseverityscoresmiddlecerebralarteryocclusionRtubulinIIIneurofilamentneurospecificenolaseBDNFBrd1JNSSIlFsEpNN盆皿大母博士番文摘妻組(P0.05)。對(duì)照組第21天已無(wú)明顯纖維結(jié)合蛋自免疫陽(yáng)性細(xì)胞，而此時(shí)干預(yù)組腦缺血周邊區(qū)仍有少量的纖維結(jié)合蛋白免疫陽(yáng)性細(xì)胞。干預(yù)

3、組第71421天腦缺血周邊區(qū)BDNF免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)分別為25.1015.7016.78士3.7512.13土3.67對(duì)照組為18.2014.5011.7012.936.9212.53干預(yù)組的BDNF免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯多于對(duì)照組(P0.05)。干預(yù)組第7天Bcl2免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為24.92士3.35對(duì)照組為19.1012.Ol干預(yù)組的Bcl2免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯多于對(duì)照組(P0.05).此外，千預(yù)組第7天腦缺血周邊區(qū)的血管結(jié)構(gòu)周?chē)^(guān)察到呈簇

4、狀分布的纖維結(jié)合蛋白免疫陽(yáng)性細(xì)胞。干預(yù)組第7天和對(duì)照組第7天腦缺血周邊區(qū)均觀(guān)察到抗Brdu抗纖維結(jié)合蛋白、抗GFAP抗纖維結(jié)合蛋白和抗nestin十抗BDNF免疫雙陽(yáng)性細(xì)胞干預(yù)組第7天的缺血周邊區(qū)觀(guān)察到抗Brdu抗BDNF免疫雙陽(yáng)性細(xì)胞。第二部分纖維結(jié)合蛋白對(duì)缺糖、缺氧海馬腦片的保護(hù)作用本研究第一部分觀(guān)察到rhGCSF可增加腦缺血周邊區(qū)纖維結(jié)合蛋白的表達(dá)。本部分?jǐn)M觀(guān)察直接運(yùn)用纖維結(jié)合蛋白對(duì)缺糖、缺氧海馬腦片的保護(hù)作用。進(jìn)一步證明rhGC

5、SF改善神經(jīng)功能的機(jī)制。分離、解剖新生SD大鼠的海馬結(jié)構(gòu)，經(jīng)切片后培養(yǎng)。取培養(yǎng)9天、生長(zhǎng)良好的海馬腦片，經(jīng)缺糖、缺氧30min(OGD)后復(fù)糖、復(fù)氧，模擬“缺血再灌注”模型。腦片分未干預(yù)組和纖維結(jié)合蛋白10vg2011g30ug干預(yù)組。各組分別培養(yǎng)137天。觀(guān)察海馬腦片的軸突生長(zhǎng)情況，用碘化丙陡熒光排斥法檢測(cè)海馬腦片細(xì)胞死亡情況，利用免疫組織化學(xué)法觀(guān)察海馬腦片Bcl2的表達(dá)情況。透射電鏡下觀(guān)察纖維結(jié)合蛋白對(duì)海馬腦片超微結(jié)構(gòu)的影響。研究結(jié)

6、果顯示:纖維結(jié)合蛋白可以明顯改善OGD海馬腦片的軸突再生。OGD后第7天未干預(yù)組、1011g20ug30Lg干預(yù)組海馬腦片死亡細(xì)胞面積百分率(00)分別為37.83土8.2230.25士6.7320.91士5.2513.0013.54統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示30ug組的死亡細(xì)胞所占面積明顯小于20ug組，后者明顯小于10ug組，三者都小于未干預(yù)組(P0.05).OGD后第7天未干預(yù)組、10ug20ag3011g干預(yù)組海馬腦片Bcl2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)分別為