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文檔簡介
1、目的:評價(jià)重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)對于D-氨基半乳糖(D-GalN)誘導(dǎo)的急性肝衰竭大鼠的影響。
方法:把雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、肝衰模型組、rhG-CSF立即給藥組、rhG-CSF延遲給藥組。除正常對照組外,其余三組均腹腔內(nèi)注射D-GaIN(1400mg/kg)建立大鼠急性肝衰竭模型。RhG-CSF立即給藥組于造模后2小時(shí)立即給予皮下注射rhG-CSF(50μg/kg),rhG-CSF延遲給藥組
2、于造模后72小時(shí)給予皮下注射rhG-CSF(50μg/kg),以上兩組分別于造模后72小時(shí)、2小時(shí)各接受一次皮下注射生理鹽水。肝衰模型組于造模后2小時(shí)、72小時(shí)給予兩次皮下注射生理鹽水。為觀察rhG-CSF對急性肝衰竭大鼠不同時(shí)間點(diǎn)的影響,于造模后12、24、48、72、120小時(shí),分別處死肝衰模型組及rhG-CSF立即給藥組5只大鼠,取血檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、總膽紅素、外周血白細(xì)胞,取肝組織做HE染色觀察肝臟病理變化,并應(yīng)用免疫組織化
3、學(xué)方法測定PCNA陽性細(xì)胞、TNF-α陽性細(xì)胞;以上兩組均取10只大鼠觀察造模后120小時(shí)生存率。RhG-CSF延遲給藥組以皮下注射rhG-CSF為觀察始點(diǎn),以肝衰造模120小時(shí)為觀察終點(diǎn),并與肝衰模型組、rhG-CSF立即給藥組進(jìn)行比較。
結(jié)果:肝臟病理結(jié)果顯示:RhG-CSF立即給藥組與肝衰模型組相比,除肝衰造模120小時(shí)外,其余各個(gè)時(shí)間點(diǎn)病理結(jié)果均顯示肝細(xì)胞壞死更為嚴(yán)重,同時(shí)伴有更為明顯的膽管再生;肝衰造模后120小
4、時(shí)的病理結(jié)果顯示,rhG-CSF立即給藥組較肝衰模型組肝臟組織結(jié)構(gòu)恢復(fù)較好伴有更少的淋巴細(xì)胞浸潤,而rhG-CSF延遲給藥組其肝臟組織結(jié)構(gòu)恢復(fù)又明顯好于rhG-CSF立即給藥組。免疫組織化學(xué)方法結(jié)果顯示:RhG-CSF立即給藥組PCNA陽性細(xì)胞數(shù)、TNF-α陽性細(xì)胞數(shù)于各個(gè)時(shí)間點(diǎn),水平均明顯高于肝衰模型組;而rhG-CSF延遲給藥組于造模后120小時(shí),PCNA陽性細(xì)胞數(shù)明顯高于肝衰模型組,但相比于rhG-CSF立即給藥組無明顯差別,TN
5、F-α陽性細(xì)胞數(shù)相比于肝衰模型組、rhG-CSF立即給藥組則均明顯減少。血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶及總膽紅素水平結(jié)果顯示:RhG-CSF立即給藥組在肝衰造模后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)其水平均高于肝衰模型組,但血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶僅于造模后24小時(shí)兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),總膽紅素水平僅于造模后12,24小時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); RhG-CSF延遲給藥組于造模后120小時(shí),血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶及總膽紅素水平與肝衰模型組及rhG-CS
6、F立即給藥組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示:于造模后各個(gè)時(shí)間點(diǎn),rhG-CSF立即給藥組均高于肝衰模型組,除造模后12小時(shí)外,其余時(shí)間點(diǎn)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); RhG-CSF延遲給藥組于造模后120小時(shí),外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高于肝衰模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但與rhG-CSF立即給藥組相比,外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)較之減少,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。RhG-CSF立即給藥組和肝衰模型組相比
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