重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子噴霧劑的研制.pdf

1、重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子，簡稱rhGM-CSF，由127個氨基酸組成，屬于非糖基化水溶性蛋白，能夠恢復(fù)骨髓粒細(xì)胞造血，加強(qiáng)造血細(xì)胞分化增殖，升高外周血白細(xì)胞，促進(jìn)刺激單核巨噬細(xì)胞和粒細(xì)胞成熟[1-3]?，F(xiàn)已廣泛用于白血病及腫瘤患者大劑量放化療后白細(xì)胞嚴(yán)重減少的治療。近年來臨床被廣泛用于外用，主要方法為使用生理鹽水溶解粉針劑，進(jìn)行含漱、棉球擦拭等方式，直接作用于患病部位。但藥物吸收利用效果不佳，開瓶使用后剩余的藥液無法保存[4-7

2、]。因此，為保護(hù)重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子液體長期儲存的活性，保證藥品穩(wěn)定、安全、有效。本論文研制了rhGM-CSF噴霧劑，并對其藥效學(xué)進(jìn)行研究，結(jié)果如下:
　　1.完成了rhGM-CSF噴霧劑處方篩選及工藝研究。通過對蛋白保護(hù)劑、透皮吸收劑、抑菌劑、磷酸鹽緩沖體系的篩選，確定了對蛋白活性影響最小、開瓶使用后療效最佳的噴霧劑處方。優(yōu)化了制備工藝，保證生產(chǎn)的樣品質(zhì)量穩(wěn)定可控;具體處方，主藥成分:重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子

3、蛋白20μg/ml，蛋白保護(hù)劑:20％羥乙基淀粉-40，抑菌劑:0.2％乙二胺四乙酸二鈉，透皮吸收劑:0.02％吐溫-80，磷酸鹽緩沖體系:1.25％磷酸氫二鈉和0.4％磷酸二氫鈉溶。
　　2.確定了rhGM-CSF噴霧劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)2010版藥典第三部內(nèi)容，建立了相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，具體為:外觀為淡黃色澄清溶液、每瓶總噴次不少于100次、每噴噴量0.08～0.12ml、裝量不少于9.5ml、pH值6.0～7.0、鑒別應(yīng)為陽性、無

4、菌檢查合格、生物學(xué)活性檢測范圍1.6×104 IU/ml～3.0×104IU/ml。通過穩(wěn)定性考察，結(jié)果表明在37±2℃條件下加速考察30天，活性平均下降10.12％，25±2℃條件下考察12個月，活性平均下降8.04％，2～8℃條件下長期考察12個月，活性平均下降4.03％，在照度4500LX±500LX室溫條件下考察10天，活性平均下降1.64％。
　　3.完成了rhGM-CSF噴霧劑毒理研究。結(jié)果表明rhGM-CSF噴霧劑外

5、用安全可靠。使用800μg/ml濃度的rhGM-CSF噴霧劑，對家兔進(jìn)行急性毒性實驗，給藥后動物未見異常，證明其無毒副作用。使用20μg/ml濃度的噴霧劑，對豚鼠進(jìn)行皮膚過敏性實驗，對家兔進(jìn)行刺激性實驗，受試動物均未出現(xiàn)過敏與刺激反應(yīng)，證明rhGM-CSF噴霧劑外用是安全的。
　　4.完成了rhGM-CSF噴霧劑對燒傷、燙傷、皮膚潰瘍及口腔潰瘍的藥效研究。使用不同濃度的噴霧劑對家兔淺Ⅱ度燒傷模型、家兔淺Ⅱ度燙傷模型、豚鼠皮膚潰瘍模