HPV病毒顆粒IgG1、IgG2亞類抗體與宮頸上皮內(nèi)瘤變關(guān)系的研究.pdf

1、本文主要從以下幾部分展開： 第一部分：HPV型別與CIN的關(guān)系探討 目的：研究不同程度宮頸病變感染人乳頭瘤病毒(HPV)的亞型種類及其與宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)的關(guān)系，并探討多種型別HPV混合感染與宮頸病變發(fā)展的關(guān)系。 方法：選取2006年9月至2007年12月，經(jīng)新柏氏薄層膜式液基細胞學檢測(TCT)異常、高危型HPV-DNA檢測(第二代雜交捕獲試驗)陽性、電子陰道鏡(EC)檢查以及宮頸活檢或?qū)m頸切除術(shù)后病理確

2、診的HPV感染及CIN病例共60例，包括HPV感染、CIN I、CIN Ⅱ-Ⅲ病例各20例，另選正常對照20例。采用核酸分子快速導流雜交基因分型技術(shù)(簡稱HybriMax)進行HPV分型檢測的研究。 結(jié)果：HPV-DNA陰性率為21.25％，HPV-DNA陽性率為78.75％，其中HPV16、58、33、31、18-DNA陽性率分別為43.75％、13.75％、7.50％、6.25％、3.75％。多種型別HPV混合感染率為12.

3、50％，其中CIN Ⅱ-Ⅲ組、HPV感染組分別為11.67％、3.33％，與宮頸炎組5％比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。宮頸癌前病變組中，HPV16-DNA陽性率為58.33％，與宮頸炎組(0)比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，其HPV58、33、31、18-DNA陽性率(13.33％、10％、8.33％、5％)與宮頸炎組(5％、10％、0、0)比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。HPV16-DNA陽性與宮頸癌前病變之

4、間呈中度相關(guān)(γ=0.479，P<0.05). 結(jié)論：①HPV16感染與宮頸癌前病變的發(fā)生密切相關(guān)，HPV多種型別混合感染與宮頸病變級別無關(guān)。②正常人群有一定HPV攜帶率。 第二部分宮頸局部HPV病毒顆粒IgG1、IgG2亞類與CIN的關(guān)系 目的：探討HPV病毒顆粒(VLPs)IgG1、IgG2亞類抗體在各級別宮頸病變患者宮頸組織中的表達及其與不同級別宮頸病變的關(guān)系。 方法：選取2006年9月至2007年

5、12月，經(jīng)TCT檢測結(jié)果異常、高危型HPV-DNA檢測(第二代雜交捕獲試驗)陽性、EC檢查以及宮頸活檢或?qū)m頸切除術(shù)后病理確診的HPV感染及CIN病例共60例，包括HPV感染、CIN Ⅰ、CINⅡ-Ⅲ病例各20例，另選正常對照20例。采用RT-PCR半定量技術(shù)和免疫組織化學染色法，檢測上述不同宮頸組織中HPVVLPs-IgG1、IgG2表達。 結(jié)果：①RT-PCR表明，研究組HPV VLPs-IgG1、IgG2mRNA表達率分別為

6、90％、87％。對照組分別為85％、90％，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。其中HPV感染組HPV VLPs-IgG1、IgG2mRNA表達率分別為90％、95％，CIN I組均為80％。HPV感染組HPV VLPs-IgG1、IgG2mRNA表達強度分別為0.611±0.033、0.458±0.076，CINⅠ組分別為1.306±0.022、1.311±0.065。前兩者比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。后兩者比較，差異有統(tǒng)計

7、學意義(P<0.05)。CIN Ⅱ-Ⅲ組宮頸組織中HPV VLPs-IgG1mRNA及IgG2mRNA表達率分別為95％、85％，與HPV感染組、CIN Ⅰ組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。但其IgG1 mRNA表達強度(1.956±0.041)卻明顯高于HPV感染組、CIN Ⅰ組，(P<0.05)。CINⅡ-Ⅲ組HPVVLPs-IgG2mRNA表達強度(1.512±0.037)與CINⅠ組、對照組(1.540±0.055)相當

8、，但HPV感染組IgG2mRNA表達強度明顯低于其它三組(P<0.05)。對照組HPVVLPs-IgG1mRNA表達率為85％，表達強度為0.403±0.005，與HPV感染組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。對照組HPV VLPs-IgG2mRNA的表達強度明顯高于其IgG1mRNA表達強度，(P＜0.05)。對照組、HPV感染組、CIN Ⅰ組以IgG2為主導狀態(tài)的百分率較CINⅡ-Ⅲ組明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)

9、。HPV感染組、CINⅠ組分別與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05). ②免疫組化結(jié)果表明，研究組宮頸組織HPV VLPs-IgG1、IgG2抗體表達率分別為62％、65％，與對照組(5％、100％)比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。隨著CIN級別增高，HPV VLPs-IgG1表達有逐漸增強趨勢。HPV VLPs-IgG1表達在CINⅡ-Ⅲ組均為陽性，在正常對照組、HPV感染組、CIN Ⅰ組分別為5％、20％、6

10、5％。HPV感染組、CIN Ⅰ組、CIY Ⅱ-Ⅲ組組間比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。HPV感染組與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。在對照組中，HPVVLPs-IgG2表達均為陽性，明顯高于其IgG1表達率。HPV感染組、CINⅠ和CINⅡ-Ⅲ組HPV VLPs-IgG2表達率分別為30％、75％、90％。HPV感染組IgG2表達率顯著低于對照組、CIN Ⅰ組、CIN Ⅱ-Ⅲ組，(P＜0.05)。CINⅠ組、CIN

11、Ⅱ-Ⅲ組與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。對照組中，HPV VLPs-IgG1主要為陰性表達，IgG2陽性細胞彌漫分布于宮頸基質(zhì)層。HPV感染組中，HPV VLPs-IgG1、IgG2陽性細胞多散在分布于宮頸基質(zhì)層，宮頸上皮層幾乎無表達。CIN Ⅰ組中，HPVVLPs-IgG1、IgG2陽性細胞彌漫分布于宮頸基質(zhì)，宮頸上皮層僅少量表達。ClNⅡ-Ⅲ組中，HPV VLPs-IgG1、IgG2陽性細胞均彌漫分布于宮頸基質(zhì)以及宮

12、頸鱗狀上皮下2／3以上或全層。 結(jié)論：②HPV VLPs-IgG1、IgG2mRNA，IgG1、IgG2陽性表達率在宮頸高級別病變中增高，可能與HPV持續(xù)感染和CIN進展有關(guān)。②機體感染HPV后，低級別宮頸病變組、對照組以IgG2主導的宮頸局部免疫狀態(tài)，可能與HPV清除和宮頸病變逆轉(zhuǎn)有關(guān)。②HPV VLPs-IgG1陽性表達位置分布與宮頸病變級別相關(guān)。 第三部分血清HPV16病毒顆粒IgG1、IgG2亞類與CIN的關(guān)系

13、 目的：探討HPV16VLPs-IgG1、IgG2亞類抗體在各級別宮頸病變患者血清中的表達及其與不同級別宮頸病變的關(guān)系。 方法：選擇2006年9月至2007年12月間，TCT檢測結(jié)果異常、高危型HPV-DNA檢測(第二代雜交捕獲試驗)陽性、EC檢查以及宮頸活檢或?qū)m頸切除術(shù)后病理確診的HPV感染及CIN病例共105例，包括HPV感染32例、CIN Ⅰ 30例、CINⅡ-Ⅲ43例，另選正常對照24例。ELISA法檢測患者血清H

14、PV16VLPs-IgG1、IgG2亞類抗體的表達水平。 結(jié)論：①血清HPV16VLPs-IgG及其亞類抗體檢測與HPV-DNA檢測結(jié)論基本一致。血清學檢測陽性既可代表現(xiàn)存HPV感染，也可表示既往HPV感染。②宮頸癌前病變尤其是CINⅠ-Ⅲ患者血清HPV16VLPs-IgG及其亞類表達增高，可能與病毒持續(xù)時間、病變嚴重程度有關(guān)。③機體感染HPV后，低級別宮頸病變組、對照組血清HPV16VLPs-IgG2抗體表達增高(IgG2／I