HPV基因分析在宮頸上皮內(nèi)瘤變中的作用和意義.pdf

1、目的:
　　 探討不同宮頸上皮內(nèi)瘤病變(Cervical Intraepithelial Neoplasia，CIN)中人乳頭瘤病毒(Human Papillomaviruses，HPV)基因型及HPV58 L1基因序列多態(tài)性分析。
　　 探討宮頸液基細(xì)胞學(xué)陰性的HPV感染與病毒負(fù)荷量、年齡因素及宮頸病變程度的關(guān)系。
　　 方法:
　　 1.(1)采用薄層液基細(xì)胞學(xué)(LCT)聯(lián)合HC2檢測(cè)HPV-DNA進(jìn)

2、行宮頸癌機(jī)會(huì)性篩查，選取LCT及HPV DNA檢測(cè)均為陽(yáng)性，且行宮頸錐形切除術(shù)后有明確組織病理學(xué)診斷者121例。宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(jí)(CIN1)35例，宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅱ級(jí)(CIN2)35例，宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅲ級(jí)(CIN3)51例。(2)行宮頸錐形切除術(shù)后將病變組織制成蠟塊，進(jìn)行切片、制片。(3)通過(guò)高通量和芯片捕獲技術(shù)檢測(cè)121例標(biāo)本中感染HPV基因型，并獲得HPV58的L1基因序列。(4)應(yīng)用DNAStar軟件對(duì)所得出的序列結(jié)果進(jìn)行比較分

3、析L1基因的多態(tài)性。
　　 2.2011年5月至2012年12月在青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院黃島院區(qū)，采用薄層液基細(xì)胞學(xué)(LCT)聯(lián)合HC2檢測(cè)HPV-DNA進(jìn)行宮頸癌機(jī)會(huì)性篩查，選取結(jié)果為L(zhǎng)CT陰性、HPV陽(yáng)性患者575例，全部行陰道鏡下宮頸活檢且有病理診斷。比較年齡、HPV病毒負(fù)荷量及病變級(jí)別之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.121例不同級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤變中，檢出HPV共79例，陽(yáng)性檢出率是(79/121)6

4、5.29％。79例HPV檢出患者中，58例單一型別感染，檢出率是(58/79)73.42％，21例多重感染，檢出率是(21/79)26.58％。單一感染中，HPV16檢出率最高，為(31/58)53.45％，其次是HPV58，檢出率為(10/58)17.24％。多重感染中，以HPV58和HPV16的多重感染為主，其中10例包含HPV58，檢出率為(10/21)47.62％，11例包含HPV16，檢出率為(11/21)52.38％。HPV

5、58+HPV16檢出率最高，為(4/21)19.05％，其次是HPV16+HPV33，檢出率為(2/21)9.52％。
　　 2.20例HPV58陽(yáng)性標(biāo)本中，全部測(cè)出L1基因序列，存在6個(gè)突變位點(diǎn)，分別是nt6014、nt6325、nt6359、nt6411、nt6416、nt6433。其中nt6014、nt6359位點(diǎn)變異導(dǎo)致所編碼的氨基酸發(fā)生改變。且nt6433位點(diǎn)A/G突變存在于全部20例標(biāo)本中，提示可能具有地域性特點(diǎn)。<

6、br>　　 3.575例患者中宮頸活檢病理診斷宮頸浸潤(rùn)癌1例，CIN3、CIN2、CIN1分別為26例、17例、46例，慢性宮頸炎485例。30-49歲組≥CIN3的患病風(fēng)險(xiǎn)是≥50歲組患者的1.556(0.357-6.776)倍;HPV病毒高負(fù)荷量組的患病風(fēng)險(xiǎn)是低負(fù)荷量組的2.017(0.760-5.350)倍。30-49歲年齡段組HPV病毒低、中、高負(fù)荷量者≥CIN2的患病率分別為3.2％、8.4％和10.5％(x2=6.684，

7、P=0.0009)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。說(shuō)明，在30-49歲年齡段，≥CIN2發(fā)生率隨著HPV病毒負(fù)荷量升高有上升趨勢(shì)。
　　 結(jié)論:
　　 1.不同級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤變中HPV感染主要型別為HPV16型及HPV58型，其中HPV58型的L1基因存在多個(gè)突變位點(diǎn)。
　　 2.在LCT陰性、HPV陽(yáng)性患者中，30-49歲年齡組高度病變患病率明顯增加，且病毒負(fù)荷量越高，其患病率越高。由此提示，臨床上3