雞抗人IgG1卵黃抗體的制備、純化和分析鑒定.pdf_第1頁
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1、抗體通常是從免疫動(dòng)物血液中獲得的，卵黃抗體(IgY)指從免疫禽蛋中提取出的針對(duì)特定抗原的抗體。利用免疫雞將特異性抗體穩(wěn)定持續(xù)地傳至卵黃中，制備特異性多克隆抗體，成本低且產(chǎn)量高，有望成為規(guī)模制備特異性抗體的有效手段。
　　 本課題主要內(nèi)容是建立制備和純化卵黃抗體的方法，并對(duì)制備出的卵黃抗體的濃度、純度、抗原親和力和抗原特異性進(jìn)行檢測(cè)。首先，建立了以水稀釋硫酸銨鹽析的方法純化卵黃抗體的純化方案，該方案不僅具有簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)和利于大規(guī)模生

2、產(chǎn)的特點(diǎn)，且純化出的卵黃抗體具有純度高、活性好等優(yōu)點(diǎn)。其次，選用卵黃中非特異性抗體濃度極低的無特定病原菌(SPF)雞，有利于制備特異性卵黃抗體。以人IgG1肌肉和皮下免疫母雞，血清檢測(cè)證實(shí)免疫方案的成功。在整個(gè)34周的免疫周期內(nèi)，檢測(cè)了每周血清和卵黃中抗體的濃度，并計(jì)算出了卵黃抗體的理論總收率為4.695 g。間接ELISA結(jié)果表明，抗人IgG1卵黃抗體對(duì)其抗原(人IgG1)親和常數(shù)高于3.0×108L/M。Western blotti

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