桃葉有效成分提取研究.pdf

1、我國地大物博，各種資源極其豐富，植物類資源就是其中的一種。桃樹屬于植物類資源，在我國被廣泛種植。桃葉，作為這種植物資源中數(shù)量較大的一部分，卻沒有得到很好的開發(fā)和利用。桃葉具有很多的藥效作用，例如它具有抗過敏、抗菌、消炎、止痛、通便的作用，另外，它還有殺蟲的功效。但是，目前對桃葉的綜合開發(fā)利用研究還很少。桃葉的藥用價值與桃葉中含有的有效成分是密不可分的。所以，本文以得到品質(zhì)優(yōu)良的有效成分產(chǎn)品為主要目標，針對其提取、純化及檢測方法進行了深入

2、的研究和探索，以便得到提取純化這些有效成分的最先進、最經(jīng)濟實用的工藝。本研究得出的結(jié)論為桃葉合理有效的利用提供了參考依據(jù)，具有一定的理論意義和應用價值。 本文以桃葉為原料，用超臨界CO2萃取法提取桃葉中的柚皮素和葉綠素，研究萃取溫度、萃取壓力、萃取時間和夾帶劑添加量對產(chǎn)品得率的影響。通過試驗，確定最佳工藝為：萃取溫度60℃，萃取壓力30MPa，萃取時間6h，料液比1∶2.0(桃葉與95％乙醇的質(zhì)量比)。檢測結(jié)果顯示，超臨界CO2

3、萃取法是提取桃葉中柚皮素和葉綠素最有效的方法。將粗提物用高速逆流色譜技術(shù)進行純化，得出最佳的純化條件為：選用氯仿∶甲醇∶水(4∶3∶2)這個容劑體系進行分離，上相為固定相(水相)，下相為流動相(氯仿相)，轉(zhuǎn)速為800r/min，流速為1.5mL/min。最后，經(jīng)計算，從100g原料可以得到6.25g粗提物浸膏，經(jīng)過HSCCC純化后可以得到0.38g葉綠素和2.00g柚皮素產(chǎn)品，二者純度分別為90％和95％以上。 本文采用有機溶劑

4、法和超聲波輔助萃取法對桃葉中的總黃酮進行了提取。通過試驗，確定有機溶劑提取法(乙醇)的最佳工藝為：乙醇濃度70％、時間4h、溫度60℃、料液比1∶25(g∶mL)；采用超聲波輔助萃取法的最佳工藝為：溶劑為70％乙醇、萃取溫度60℃、料液比1∶20(g∶mL)、超聲波功率225w、萃取時間40min。有機溶劑法可以使總黃酮得率達到7.48％；超聲波輔助萃取法可以達到7.51％。二者提取結(jié)果雖然相近，但是后者所用時間明顯短于前者，溶劑用量也

5、小于前者。所以，采用超聲波輔助萃取法提取桃葉中的總黃酮不僅可以大大縮短生產(chǎn)周期，還可以減少溶劑用量降低成本。將總黃酮粗提物用大孔吸附樹脂法進行純化，其最佳純化工藝為：將超聲波輔助萃取法得到的粗提液用石油醚法除去葉綠素后，采用AB-8大孔吸附樹脂，將濃度為0.112mg/mL的上柱液上柱4BV，以1.0mL/min吸附流速進行吸附，吸附完畢后，用濃度為80％的乙醇溶液進行洗脫，洗脫流速為0.6mL/min，收集洗脫液即得到總黃酮純化液。經(jīng)

6、測定，收集液干燥后得到的純化物中，總黃酮的含量為46.1％。 本文確立了薄層層析法定性分析桃葉中柚皮素的方法，分析條件為：吸附劑，薄層層析硅膠；展開劑，氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(15∶40∶22∶10)，10℃以分層的下層溶液為展開劑；檢出，2％的三氯化鋁乙醇試液，置紫外燈(365nm)下觀察。柚皮素經(jīng)絡合后在紫外燈的照射下顯黃綠色熒光。 本文確立了紫外分光光度法分析桃葉中柚皮素的方法。對柚皮素標準品和超臨界提取物進行光

7、譜掃描，結(jié)果顯示二者在325nm處有吸收峰，因此確定325nm為紫外分光光度法分析柚皮素的檢測波長。紫外分光光度法簡便，對樣品處理要求不高，可以作為常規(guī)的分析方法。 本文確立了高效液相色譜法(HPLC)分析桃葉中的柚皮素和奎寧酸的方法。分析桃葉中柚皮素的HPLC條件為：流動相，甲醇-水-乙酸(46∶53∶1)；柱溫，40℃；色譜柱，ODS反相柱，250×4.6mm，孔徑5μm；流速，1mL/min；檢測波長，290nm。分析桃葉

8、中奎寧酸的HPLC條件為：流動相，3％甲醇-0.01mol/L磷酸氫二鈉(pH2.53，用濃度≥85.0％的磷酸調(diào)節(jié)，酸堿滴定儀調(diào)節(jié)控制)；柱溫，30℃；色譜柱，ODS反相柱，250×4.6mm，孔徑5μm；流速，0.7mL/min；檢測波長，210nm。HPLC法具有靈敏、準確等特點。本文所確定的HPLC方法可以為生產(chǎn)過程中更為準確地進行柚皮素和奎寧酸的檢測提供依據(jù)。 另外，本文還初步研究了柚皮素純化物的抑菌活性。試驗結(jié)果表明