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文檔簡介
1、氧化損傷是導(dǎo)致人類疾病的一個(gè)重要因素??寡趸瘎┠軌蝾A(yù)防或改善這些疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),尤其是對癌癥的預(yù)防。黑色食品富含多酚、黃酮、花青素等多種活性成分,具有很好的保健功效,因而引起國內(nèi)外眾多學(xué)者的廣泛關(guān)注。
本課題以黑米、黑豆、黑蕓豆、熊貓豆為實(shí)驗(yàn)材料,通過80%丙酮浸提獲得四種提取物,檢測其中生物活性成分,結(jié)果顯示,黑米、黑豆、熊貓豆和黑蕓豆中都含有一定的多酚、黃酮、花青素和原花青素,其中,黑米的含量最高,熊貓豆作為國內(nèi)珍稀名貴豆
2、種,其多酚和黃酮含量也很高。通過體外化學(xué)模擬體系,發(fā)現(xiàn)四種雜糧提取物對不同自由基(DPPH·、ABTS·+、·OH)均表現(xiàn)出較好的清除能力,顯示出很強(qiáng)的鐵離子還原能力,且與濃度呈現(xiàn)顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系。其中黑米提取物對不同自由基的清除能力最強(qiáng),IC50分別為3.96×10-4 g/mL(DPPH·)、1.2×10-2 g/mL(ABTS·+)、8.55×10-2 g/mL(·OH)。根據(jù)相關(guān)性分析結(jié)果,推測多酚和黃酮是四種黑色雜糧提取物發(fā)
3、揮抗氧化能力的主要成分。
選擇乳腺癌細(xì)胞MCF-7和結(jié)腸癌細(xì)胞Caco-2為靶細(xì)胞,通過體外細(xì)胞培養(yǎng)體系,利用MTT法檢測四種雜糧提取物的抑制腫瘤能力。結(jié)果表明,四種提取物對MCF-7細(xì)胞和Caco-2細(xì)胞增殖均有抑制作用,且呈現(xiàn)濃度依賴性。黑米提取物對MCF-7細(xì)胞的抑制效果最好,IC50為181.34μg/mL,而對于Caco-2細(xì)胞,熊貓豆提取物的抑制能力最強(qiáng),IC50為306.38μg/mL。相關(guān)性分析結(jié)果表明,多酚和
4、黃酮是四種黑色雜糧提取物抑制腫瘤的主要活性成分。
選擇抑瘤效果最好的熊貓豆為研究對象,結(jié)腸癌細(xì)胞 Caco-2為靶細(xì)胞,利用瓊脂糖凝膠電泳、流式細(xì)胞術(shù)、酶聯(lián)免疫分析等技術(shù)與方法對熊貓豆提取物抑瘤機(jī)理進(jìn)行了系統(tǒng)研究。經(jīng)不同濃度熊貓豆提取物處理72 h后的Caco-2細(xì)胞,倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞存活率減少,進(jìn)一步驗(yàn)證了熊貓豆提取物的抑瘤作用,提取誘導(dǎo)后細(xì)胞DN A,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳觀察到典型的凋亡細(xì)胞梯狀DN A條帶,流式細(xì)胞術(shù)分
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