免疫抑制狀態(tài)下新西蘭大白兔肺部真菌感染模型建立的研究.pdf

1、目的：建立適合影像學(xué)研究使用的新西蘭大白兔的新型隱球菌、白念菌、煙曲霉菌肺炎動(dòng)物模型,為進(jìn)一步的臨床、病理、影像學(xué)診斷對(duì)照研究打下基礎(chǔ)。 材料與方法：選擇健康雄性新西蘭大白兔72只,分為新型隱球菌組、自念菌組、煙曲霉組,每組中設(shè)立實(shí)驗(yàn)組18只,對(duì)照組6只,新型隱球菌對(duì)照組為未注射免疫抑制劑,而接種了新型隱球菌懸浮液,白念菌組和曲霉菌組對(duì)照組為注射了免疫抑制劑而注射了等量的生理鹽水。新型隱球菌實(shí)驗(yàn)組和白念菌組使用相同的方法使兔達(dá)到

2、免疫抑制狀態(tài)：于實(shí)驗(yàn)第1-5天,每日耳緣靜脈注射阿糖胞苷440mg/m2,6天后隔日一次維持免疫抑制狀態(tài)。第4日起,所有兔給予萬(wàn)古霉素15mg/kg、頭孢他定150mg/kg靜脈注射,每日1次；慶大霉素5mg/kg靜脈注射,隔日1次預(yù)防細(xì)菌感染。于第6日行經(jīng)皮氣管內(nèi)穿刺法分別接種配置好新型隱球菌0.4ml(濃度2.5×108個(gè)/ml)懸浮液和白念菌懸浮液0.2ml(濃度5×108個(gè)/ml)的懸浮液,白念菌對(duì)照注射等量的生理鹽水。煙曲霉組

3、于實(shí)驗(yàn)第1-5天、第8、9天,每日耳緣靜脈注射阿糖胞苷525mg/m2、第1-2天每日耳緣靜脈注射甲基強(qiáng)地松龍5mg/kg,第4天起給予萬(wàn)古霉素15mg/kg、頭孢他定150mg/kg靜脈注射,每日1次；慶大霉素5mg/kg靜脈注射,隔日1次預(yù)防細(xì)菌感染,于第2日行經(jīng)皮氣管內(nèi)穿刺法接種配置好的0.4m1煙曲霉懸浮液(濃度為1×108個(gè)/ml),對(duì)照組注射等量的生理鹽水。每組分別于實(shí)驗(yàn)前和接種前抽耳緣靜脈血做血常規(guī)檢查了解粒細(xì)胞值的變化。

4、每組所用兔在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)進(jìn)行一次胸部CT檢查,接種后每隔一天行胸部CT檢查了解肺部的影像學(xué)表現(xiàn),并于接種后每2-3天隨機(jī)處死3-4只肺部有陽(yáng)性表現(xiàn)兔(如有兔死亡量酌減),無(wú)菌操作下剖胸取出肺組織標(biāo)本行真菌培養(yǎng)和病理檢查,了解上述真菌在肺內(nèi)的生長(zhǎng)和致病情況。 結(jié)果： 1、三種組兔耳緣靜脈血粒細(xì)胞計(jì)數(shù)在注射免疫抑制劑后明顯降低,行配對(duì)t檢驗(yàn)P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2、新型隱球菌組的實(shí)驗(yàn)組接種成功率為100％(18

5、/18),模型建立成功率為83.33％(15/18)。對(duì)照組模型建立成功率為33.33％(2/6),與實(shí)驗(yàn)組統(tǒng)計(jì)學(xué)有明顯差異。 3、白念菌組的實(shí)驗(yàn)組接種成功率為100％(18/18),模型建立成功率為88.89％(16/18)。對(duì)照組模型建立成功率為16.6796(1/6),與實(shí)驗(yàn)組統(tǒng)計(jì)學(xué)有明顯差異。 4、煙曲霉組的實(shí)驗(yàn)組接種成功率為100％(18/18),模型建立成功率88.89％(16/18),對(duì)照組接種和模型成功率