膿毒癥患者大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷與Occludin表達(dá)的關(guān)系.pdf

1、目的：膿毒癥(sepsis)是具有感染證據(jù)的全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)，是一個(gè)亟待解決的重要臨床問題，其所致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的機(jī)制，主要與內(nèi)毒素(LPS)及炎癥因子作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞并破壞其屏障功能有關(guān);Occludin蛋白是構(gòu)成血管內(nèi)皮屏障緊密連接的主要蛋白。研究顯示膿毒癥動(dòng)物組織血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，同時(shí)伴隨著Occludin蛋白的定位或表達(dá)量的改變。本研究擬檢測(cè)緊密連接蛋白Occludin表達(dá)，并以電鏡觀察膿毒癥患者大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮

2、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步驗(yàn)證膿毒癥患者大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞的改變，以及與緊密連接蛋白Occludin表達(dá)的關(guān)系。
　　 方法：符合SIRS診斷標(biāo)準(zhǔn)(2001年國(guó)際膿毒癥會(huì)議制定)，有腹部確切感染征象，并行腹部手術(shù)治療的成年患者納入本研究。根據(jù)是否發(fā)生休克，將納入患者歸類為膿毒癥（sepsis）組（10例）和膿毒癥休克(septic shock)組（10例）。另外隨機(jī)選取10例腹部手術(shù)非膿毒癥患者作為對(duì)照組。收集納入患者手術(shù)當(dāng)天的臨床資

3、料，如降鈣素原(PCT)、急性生理和慢性健康狀況(APACHEⅡ)評(píng)分、序貫器官衰竭估計(jì)(SOFA)評(píng)分，綜合評(píng)價(jià)膿毒癥患者病情嚴(yán)重程度。收集納入患者手術(shù)過程中所切除大網(wǎng)膜的動(dòng)脈血管2cm，分別用4％多聚甲醛溶液和2.5％戊二醛溶液固定1 cm。4％多聚甲醛溶液固定部分采用石蠟包埋切片，使用免疫組織化學(xué)技術(shù)，檢測(cè)Occludin表達(dá)量;2.5％戊二醛溶液固定部分送至我院電鏡室，觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞間隙變化，依照《黎鰲燒傷學(xué)》血

4、管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[1]，根據(jù)電鏡下內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，進(jìn)行評(píng)分。比較各組患者Occludin表達(dá)量的變化，分析膿毒癥患者大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷與Occludin表達(dá)的關(guān)系。所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：⑴膿毒癥組及膿毒癥休克組患者體溫、白細(xì)胞計(jì)數(shù)均顯著高于對(duì)照組(P＜0.001);平均動(dòng)脈壓顯著低于對(duì)照組(P＜0.001)。膿毒癥休克組體溫、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、PCT、APACHEⅡ評(píng)分和SO

5、FA評(píng)分顯著高于膿毒癥組(P＜0.01);平均動(dòng)脈壓顯著低于膿毒癥組(P＜0.01)。⑵電鏡觀察大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞，膿毒癥組與膿毒癥休克組患者內(nèi)皮細(xì)胞損傷評(píng)分顯著高于對(duì)照組（P＜0.01）;膿毒癥休克組患者內(nèi)皮細(xì)胞損傷評(píng)分顯著高于膿毒癥組(P＜0.01);細(xì)胞間隙亦有明顯增寬。⑶膿毒癥組及膿毒癥休克組與對(duì)照組相比Occludin蛋白表達(dá)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）;膿毒癥組與膿毒癥休克組Occludin蛋白表達(dá)無顯著差異