膿毒癥中PTEN在內(nèi)皮細胞中的表達.pdf

1、目的：探討PTEN在膿毒癥內(nèi)皮細胞中的表達
　　 方法：80只健康SD雄性大鼠(250g±29g)，隨機分為4組(每組20只)，盲腸結(jié)扎穿孔三組(25％、50％、75％)和對照組，通過比較盲腸結(jié)扎的不同比例觀察膿毒癥大鼠的生存率；盲腸結(jié)扎50％穿孔組作為膿毒癥造模組，在膿毒癥造模48小時后取血液和肺組織樣本，檢測膿毒癥大鼠血液中LPS、IL-1β、IL-6以及TNF-α的濃度。用血漿作用于體外培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細胞，并應(yīng)用免疫組化

2、方法檢測PTEN的表達狀況；用Westen-blot的方法檢測臍靜脈內(nèi)皮細胞中PTEN蛋白的表達，并用RT-PCR的方法檢測PTEN的tuRNA的水平。
　　 結(jié)果：通過觀察我們發(fā)現(xiàn)隨著盲腸結(jié)扎比例的提高，膿毒癥大鼠的死亡率也在增加，最后我們采用50％結(jié)扎比例的盲腸作為CLP的標(biāo)準(zhǔn)模型。經(jīng)檢測LPS：對照組為0.19±0.1(pg/ml)，膿毒癥組為3.39±1.26(pg/ml)；IL-6：對照組為20.35±8.11(pg/

3、ml)，膿毒癥組為314.81.92±48.7(pg/ml)；IL-1β：對照組為18.73±4.76(pg/ml)，膿毒癥組為125.9±17.98(pg/ml)；TNF-α：對照組為12.54±5.76(pg/ml)，膿毒癥組為105.59±18.97(pg/ml)。各種指標(biāo)在膿毒癥組均明顯上升，與對照組相比較均有顯著性差異(p<0.05)。免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)在CLP組臍靜脈內(nèi)皮細胞中PTEN的表達明顯增高；Westen-blot的方