脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體對(duì)豬脂肪沉積的調(diào)控及相關(guān)機(jī)理研究.pdf

1、本研究利用豬脂肪組織細(xì)胞膜蛋白制備卵黃抗體，并通過(guò)不同的試驗(yàn)對(duì)其免疫學(xué)活性、穩(wěn)定性、生物安全性以及生物學(xué)效應(yīng)進(jìn)行了評(píng)估，旨在探討脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體對(duì)豬脂肪沉積的影響并通過(guò)在體、離體兩方面，從整體、組織、細(xì)胞以及分子水平上探討脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體影響脂肪沉積的可能機(jī)制。 1 脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體對(duì)豬脂肪沉積的影響1.1脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體的制備及穩(wěn)定性結(jié)果表明：蛋雞四免后，經(jīng)ELISA檢測(cè)，卵黃抗體效價(jià)達(dá)

2、1∶12 800以上；卵黃抗體與機(jī)體非脂肪組織的交叉反應(yīng)較弱；凍干法對(duì)抗體效價(jià)影響?。豢贵w具有良好的熱穩(wěn)定性；室溫下抗體保存300 d效價(jià)仍達(dá)1∶12 800。提示：用豬脂肪細(xì)胞膜蛋白免疫蛋雞可制備高效價(jià)的特異抗體，其凍干粉仍保持較高效價(jià)、熱穩(wěn)定性好、耐貯存，便于生產(chǎn)上應(yīng)用。 1.2脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體的生物安全性通過(guò)大鼠、豬的慢性毒性試驗(yàn)初步評(píng)估脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體的生物安全性。試驗(yàn)結(jié)果表明：大鼠75 d慢性毒性試

3、驗(yàn)中未見(jiàn)明顯中毒癥狀和死亡發(fā)生，體重、一般臨床檢查、飼料利用率等指標(biāo)無(wú)異常；生長(zhǎng)育肥豬104 d后除了發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組公豬脾臟指數(shù)較高外，一般臨床檢查、飼料利用率、生化、臟器病理組織學(xué)等指標(biāo)均無(wú)異常，未發(fā)現(xiàn)該抗體有明顯的毒性作用。提示：脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體粉無(wú)明顯的毒副作用。 1.3對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能和脂肪沉積的影響本試驗(yàn)以脂肪沉積能力較強(qiáng)的杜×(長(zhǎng)·梅)三元雜交商品豬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，探討脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體對(duì)不同日齡豬的生

4、長(zhǎng)性能和胴體品質(zhì)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明：在豬的生長(zhǎng)前期添加75mg·kg<'-1>脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體粉后，實(shí)驗(yàn)組平均日增重、飼料報(bào)酬分別提高13.03％(P<0.01)和7.9％；瘦肉率提高10.3％(P<0.01)；實(shí)驗(yàn)組背膘厚、腎周脂肪指數(shù)、腸系膜脂肪指數(shù)和皮下脂肪指數(shù)分別下降24.14％(P<0.01)、27.54％(P<0.05)、20.42％(P<0.01)和28.28％(P<0.01)： 飼料中添加脂肪組織細(xì)胞

5、膜蛋白卵黃抗體粉可改善肉色，而肌肉pH<,45>值、大理石紋和肌內(nèi)脂肪含量組問(wèn)差異均不顯著。在豬生長(zhǎng)后期進(jìn)行同樣處理，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組豬6～7肋背膘厚、腎周脂指數(shù)、腸系膜脂指數(shù)、皮下脂肪指數(shù)皆有明顯的下降趨勢(shì)，但差異不顯著。結(jié)果提示：在育肥豬早期日糧中添加脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體可促進(jìn)豬生長(zhǎng)，提高胴體瘦肉率，降低脂肪比率，改善肉質(zhì)性狀。 2 脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體影晌豬脂肪沉積的機(jī)制研究2.1對(duì)豬脂肪代謝相關(guān)激素和酶活性的影響豬的日糧中

6、添加75 mg·kg<'-1>脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體粉，104 d后，血清FFA濃度明顯升高(P<0.01)，血清葡萄糖和甘油三酯濃度無(wú)明顯差異；實(shí)驗(yàn)組血清insulin濃度降低30.81％(P<0.05)，leptin濃度下降30.74％(P<0.05)；不同部位脂肪細(xì)胞的直徑顯著降低；脂肪組織ME活性變化不顯著；脂肪組織LPL活性以及脂肪組織與肌肉組織LPL活性的比值顯著下降(P<0.05)。提示：脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體可以

7、影響脂肪細(xì)胞的脂肪合成；血清insulin、leptin以及組織LPL活性的改變可能參與這種作用的調(diào)節(jié)。 2.2對(duì)豬脂肪組織凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組豬的皮下、腎周、腸系膜脂肪組織DNA含量分別比對(duì)照組下降38.42％(P<0.01)、39.92％(P<0.05)和39.16％，而DNA濃度差異不顯著；實(shí)驗(yàn)組脂肪組織Bcl-xl mRNA相對(duì)豐度比對(duì)照組下降18.13％(P<0.05)；實(shí)驗(yàn)組脂肪組織BaX-α

8、mRNA相對(duì)豐度比對(duì)照組提高13.79％(P<0.05)。提示：日糧中添加脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體使Bax-α與Bcl-xl基因表達(dá)失去平衡，可能誘導(dǎo)豬的脂肪細(xì)胞凋亡，上調(diào)的Bax-α和下調(diào)的Bcl-xl mRNA表達(dá)說(shuō)明脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體是通過(guò)線(xiàn)粒體途徑誘導(dǎo)脂肪細(xì)胞凋亡。 2.3對(duì)脂肪細(xì)胞增殖及其凋亡的影響結(jié)果表明，用不同濃度(0.1、1.0、10μg/ml)的脂肪組織細(xì)胞膜蛋白卵黃抗體處理可抑制前脂肪細(xì)胞增殖，影響