鴨群中禽白血病病毒的核酸檢測.pdf

1、禽白血病是由禽白血病/肉瘤病毒群引起的以造血細胞增生為主的一類腫瘤性疾病。禽白血病病毒(Avian leukosis virus)屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科的a-反轉(zhuǎn)錄病毒屬。根據(jù)其囊膜蛋白的不同，禽白血病在雞的體內(nèi)分為A、B、C、D、E、J六個亞群。其中，E亞群病毒為內(nèi)源性禽白血病病毒，普遍存在于雞群中，幾乎沒有致瘤性，對雞群的影響較低。A、B、J亞群是雞群中引發(fā)腫瘤的主要外源性ALV，C、D亞群的外源性ALV較為少見。其他的內(nèi)源性ALV如F、

2、G、H、I，存在于雉、鵪鶉、鷓鴣等鳥體內(nèi)。
　　雞是禽白血病病毒的自然宿主，而目前為止，還沒有關(guān)于鴨群中禽白血病的報道。為了解鴨群中禽白血病的流行情況，本研究采集了四川綿陽、江蘇徐州、山東煙臺、濰坊、聊城和濱州六個不同地區(qū)鴨群的鴨子組織樣品共510份，通過PCR方法用p27抗原檢測鴨子體內(nèi)禽白血病病毒核酸的攜帶情況。根據(jù)核酸序列測定分析，結(jié)果表明:11％(58/510)的鴨子體內(nèi)攜帶禽白血病病毒的核酸。另外設計引物對58份陽性樣品

3、進行完整的env基因擴增，結(jié)果其中2份擴增出完整的env基因，長度為1857bp，另有5份擴增出缺失808bp的env基因，長度為1049bp。將擴增出的7份陽性樣品的env基因與ALV各個型的env基因進行序列比對，結(jié)果顯示其與內(nèi)源性E亞群ALV的env基因高度同源。研究結(jié)果顯示ALV的核酸在鴨群中普遍存在，并呈現(xiàn)出與雞的白血病病毒核酸不一樣的分子生態(tài)，但是否在鴨群中存在外源性白血病病毒仍然需要進一步研究。
　　近年來，我國不少

4、地區(qū)尤其是地方品系雞中分別分離到A亞群和B亞群禽白血病病毒，這說明我國雞群中ALV存在的普遍性。繼ALV-J的特異性單克隆抗體研制成功后，抗A、B亞群ALV囊膜糖蛋白的單克隆抗體也成功的制備出來，為外源性ALV的診斷提供了依據(jù)，但均不能區(qū)分A、B亞群ALV。
　　為區(qū)分經(jīng)典型A、B亞群ALV，本研究通過比較A、B亞群ALV的gp85基因，對B亞群ALV的gp85基因進行了部分分段原核表達，免疫小鼠獲得單因子血清，用獲得的單因子血清