棉花抗黃萎病相關(guān)基因GhCyP、GhDAHPS、GhCCoAOMT的功能研究.pdf

1、本研究以課題組從棉花抗病品種冀棉20黃萎病脅迫下的SSH文庫(kù)中篩選得到的抗黃萎病相關(guān)基因(GhCyP、GhCCAOMT、GhDAHPS)為研究對(duì)象,通過(guò)Real-timePCR對(duì)GhCyP、GhDAHPS、GhCCAOMT基因在不同抗性品種中的表達(dá)進(jìn)行分析;構(gòu)建完成GhCyP、GhCCAOMT、GhDAHPS基因的真核表達(dá)載體;對(duì)擬南芥及棉花進(jìn)行了轉(zhuǎn)化;并進(jìn)一步對(duì)GhCyP基因的抗黃萎病功能進(jìn)行了初步鑒定。研究結(jié)果對(duì)了解黃萎病發(fā)生發(fā)展過(guò)

2、程中相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控,發(fā)掘高效的抗黃萎病基因資源,進(jìn)而為抗黃萎病育種提供理論依據(jù)和物質(zhì)基礎(chǔ)具有重要意義。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.感病品種“邯208”、抗黃萎病品種“冀棉20”和“Pima90-53”,接種黃萎病菌后,用Real-timePCR方法分析GhCyP、GhCCAOMT、GhDAHPS基因的表達(dá)變化,發(fā)現(xiàn)相關(guān)基因接菌后在不同抗性品種中存在表達(dá)差異。
　　 2.構(gòu)建完成了真核表達(dá)載體pBI-GhCyP、pC

3、am-CCoAOMT、pCam-DAHPS.
　　 3.采用浸花法將構(gòu)建的表達(dá)載體pCam-GhCyP、pCam-CCoAOMT、pCam-DAHPS分別轉(zhuǎn)化Columbia型擬南芥,經(jīng)抗生素篩選和PCR檢測(cè)得到了T3轉(zhuǎn)基因株系。
　　 4.采用花粉通道法,將GhCyP、GhCCoAOMT、GhDAHPS基因轉(zhuǎn)化棉花品種“邯208”、“中棉所8號(hào)”、“冀棉11號(hào)”,經(jīng)PCR檢測(cè)得到轉(zhuǎn)GhCyP基因T1棉花10株、轉(zhuǎn)GhC