2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩115頁未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、遺傳多樣性的量化與分類是收集和利用種質(zhì)資源的重要前提。利用簡單重復(fù)序列(SSRs)和隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNAs(RAPDs)兩種分子標(biāo)記對來自我國各個棉區(qū)的30份陸地棉轉(zhuǎn)基因種質(zhì)材料進(jìn)行了遺傳多樣性分析,材料包含有我國的現(xiàn)有的三種轉(zhuǎn)基因類型。利用NTSYS-pc2.10統(tǒng)計分析軟件,采用Jaccard's相似系數(shù)UPGMA法進(jìn)行聚類。結(jié)果表明三類轉(zhuǎn)基因材料大致分為不同的兩類,而且不同棉區(qū)的轉(zhuǎn)基因材料交叉分布。相似系數(shù)分析表明,我國轉(zhuǎn)基因材料

2、的遺傳多樣性相對較為豐富。 同時利用這兩種分子標(biāo)記對31份陸地棉種質(zhì)資源進(jìn)行了遺傳多樣性分析,其中14份材料是最近從美國和伊朗引進(jìn)。從有多態(tài)性的21個RAPD引物和18對SSR引物中共獲得117個多態(tài)性位點(diǎn)。利用NTSYS-pc2.10統(tǒng)計分析軟件,采用Jaccard's相似系數(shù)UPGMA法進(jìn)行聚類。結(jié)果表明從國內(nèi)來的17份材料部分聚為一類,從國外來的14份材料大部分聚為另一類,其他材料相間排列;分別對31份材料的相似系數(shù)和來自

3、中國的17份材料的相似系數(shù)進(jìn)行了比較分析,國內(nèi)材料相對于新引進(jìn)的國外材料的遺傳多樣性水平稍高,國內(nèi)和國外材料之間的遺傳差異較大。這說明擴(kuò)大不同地區(qū)間種質(zhì)資源的交流和引進(jìn)種質(zhì)資源可以豐富本地材料的遺傳多樣性?,F(xiàn)階段積極引進(jìn)、正確評價和有效利用種質(zhì)資源仍具有重要意義。 黃萎病是由大麗輪枝菌(Verticilliumdahliaekleb.)引起的土傳性真菌維管束病害,近年來在世界上對棉花和許多作物造成嚴(yán)重的產(chǎn)量和品質(zhì)損失。本研究以對

4、黃萎病有抗性的海島棉Pima90為材料,利用改良的異硫氰酸胍法抽提棉花根組織材料的總RNA。在幼苗接種黃萎病病原菌后2、4、8、12、24、48、72和96h分別取幼根以抽提棉花總RNA。以未接種病原的棉花cDNA為驅(qū)動方,以接種病原的棉花cDNA為試驗方,利用SSH法對接種病原后的棉花cDNA進(jìn)行差減雜交以分離對抗病反應(yīng)的基因。SSH文庫包含534個克隆,以M13引物對擴(kuò)增插入片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增,電泳結(jié)果顯示插入片段大小從0.2至1.

5、2kb不等,平均大小為0.5kb。將克隆中的插入片段點(diǎn)種于尼龍膜上,分別以病原誘導(dǎo)前后的總cDNA為探針進(jìn)行反向Northern雜交。對88個在海島棉的抗病反應(yīng)中表達(dá)有差異的克隆進(jìn)行了測序并對測序結(jié)果在NCBI上利用Blastn和Blastx進(jìn)行序列相似性分析。結(jié)果表明大部分陽性克隆與擬南芥、棉花等多個物種不同逆境條件下誘導(dǎo)的相關(guān)基因或表達(dá)序列相同或同源。鑒定到一些與抗病反應(yīng)相關(guān)的基因如棉花病程蛋白家族10、擬南芥抗病反應(yīng)蛋白家族、谷胱

6、甘肽S轉(zhuǎn)移酶等。同時分離到一些參與轉(zhuǎn)錄和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的因子如MYB轉(zhuǎn)錄因子家族、轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白家族WD-40repeat和Cys2/His2類的鋅指蛋白等。兩個與植物激素調(diào)節(jié)相關(guān)基因同源的EST可能在棉花抗病反應(yīng)中起作用。SSH文庫的構(gòu)建和分析將有助于了解棉花抗黃萎病反應(yīng)的分子機(jī)制。 從SSH文庫中分離到兩個海島棉受黃萎病誘導(dǎo)表達(dá)的基因GbPR1和GbPR2。GbPR1轉(zhuǎn)錄本長為701堿基,包含一個528堿基的完整開放閱讀框。它編碼一個1

7、76個氨基酸的多肽,其分子量為18.9kD,等電點(diǎn)為6.34。利用GeneBank的BlastX進(jìn)行同源性序列分析時發(fā)現(xiàn)其與擬南芥抗病反應(yīng)相關(guān)蛋白家族成員有46%的同源性且具有相同的保守結(jié)構(gòu)域Dirigent。生物信息學(xué)分析表明,GbPR1的N端具有一典型的信號肽序列??缒そY(jié)構(gòu)預(yù)測表明該蛋白的N端和C端分別有一跨膜結(jié)構(gòu),且兩者的方向都為由胞內(nèi)向胞外。蛋白N端的跨膜結(jié)構(gòu)末端與其信號肽序列位置相重疊。對該蛋白質(zhì)功能預(yù)測表明其功能與生物的免疫

8、反應(yīng)有關(guān)。Northern雜交和RT-PCR分析表明其在海島棉中受黃萎病誘導(dǎo)表達(dá)。GbPR2轉(zhuǎn)錄本長為804bp,包含一個522bp的完整開放閱讀框。它編碼一個174個氨基酸的多肽,其分子量為18.6kD,等電點(diǎn)為6.59。GbPR2與擬南芥抗病反應(yīng)相關(guān)蛋白家族成員有39%的同源性但具有相同的保守結(jié)構(gòu)域Dirigent。生物信息學(xué)分析表明GbPR2與GbPR1具有類似的功能和信號肽序列。GbPR1和GbPR2的最大差異位于其N端,GbP

9、R2沒有檢測到典型的跨膜結(jié)構(gòu)。MIC-3與棉花線蟲抗性相關(guān),受線蟲誘導(dǎo)表達(dá),但在本實(shí)驗的SSH文庫中高頻出現(xiàn)。Northern雜交表明其也受黃萎病誘導(dǎo),MIC-3可能是棉花基礎(chǔ)抗性反應(yīng)中的一個因子。 病程相關(guān)蛋白(PR)-10是從SSH文庫中分離到的另一基因家族。該類蛋白具有內(nèi)源核酸酶活性,已在多種植物中被分離到。它們的具體功能目前尚不清楚,但在植物的抗生物和非生物逆境脅迫中具有重要作用。鑒定到三個具全長ORF的轉(zhuǎn)錄本,它們與棉

10、花PR-10蛋白高度同源。Northern雜交和RT-PCR表明它們在海島棉根中組成型表達(dá),但受病原菌誘導(dǎo)后表達(dá)增強(qiáng)。在海島棉、陸地棉和中棉基因組的Southern雜交表明PR-10在棉屬中是一個小的多基因家族。利用ClustalX對GeneBank中的9個PR-10蛋白序列進(jìn)行比對,進(jìn)化樹上該家族被分為三個亞家族。根據(jù)蛋白質(zhì)序列的N端、保守的病程結(jié)構(gòu)域Betv1中的GGPLGDKLEKI模體和蛋白質(zhì)C端設(shè)計合成引物。RT-PCR結(jié)果顯

11、示該基因包括一個內(nèi)含子和兩個外顯子。利用PCR對PR-10基因在14個棉花材料,代表了11個棉種和10種基因組類型,進(jìn)行擴(kuò)增。測序結(jié)果顯示內(nèi)含子序列長度從74到98個堿基,富含T。對基因組序列的多序列對比結(jié)果與前者由蛋白序列所得結(jié)果相似,內(nèi)含子和外顯子在各個亞家族中的不同棉種中同樣保守。對植物的PR-10的進(jìn)化分析表明,PR-10在植物中進(jìn)化上相互獨(dú)立。雙子葉植物和單子葉植物的PR-10間親緣關(guān)系較遠(yuǎn),雙子葉植物內(nèi)的親緣關(guān)系較近。因此P

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論