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文檔簡介
1、研究目的:
本文章通過對停訓(xùn)小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活及其激活因子MyoD、HGF、MGFmRNA變化的研究,分析肌衛(wèi)星細(xì)胞激活及其激活因子在停訓(xùn)不同時相動態(tài)變化的特征,為探討停止訓(xùn)練后失重骨骼肌廢用性萎縮的可能性始動機(jī)制,以及因停止訓(xùn)練所引起的廢用性肌肉萎縮的治療和預(yù)防提供參考資料。
試驗方法:
本研究中,選取健康雄性5周齡昆明小鼠48只,適應(yīng)環(huán)境和適應(yīng)跑臺訓(xùn)練各3天后,隨機(jī)分為安靜對照組(C組,n=8)和實
2、驗組(E組,n=40)。實驗組(E組,n=40),根據(jù)取材時間點的不同隨機(jī)分為停止訓(xùn)練0h實驗組(E0組,n=8)、12h實驗組(E1組,n=8)、24h實驗組(E2組,n=8)、3d實驗組(E3組,n=8)、7d實驗組(E4組,n=8)。安靜對照組正?;\養(yǎng)8周,實驗組進(jìn)行8周遞增負(fù)荷跑臺訓(xùn)練,且最后一次停訓(xùn)后即刻,C組和E0組脫臼且取左右后肢股四頭肌。采用免疫組化、ELISA試驗方法、RT-PCR法,測停訓(xùn)不同時間肌肉組織中肌衛(wèi)星細(xì)胞
3、激活(Pax7為激活標(biāo)記蛋白)及激活因子MyoD、HGF、MGFmRNA的表達(dá);E1組、E2組、E3組、E4組8周運(yùn)動后尾部懸吊,后肢離地,身體長軸與水平夾角為30°,前肢自由活動保證小鼠自由飲食飲水。E1組、E2組、E3組、E4組分別于停訓(xùn)尾部懸吊12h、24h、3d、7d做上述同樣取材和測試。把實驗數(shù)據(jù)輸入Microsoft Excel中存儲,建立數(shù)據(jù)庫,采用SPSS17.0 for windows軟件系統(tǒng)處理實驗數(shù)據(jù),所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計
4、結(jié)果均以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±SD)表示。C組、E0組、E1組、E2組、E3組、E4六組之間采用單因素方差(One-Way ANOVA)分析,并進(jìn)行后續(xù)檢驗的多重比較(Post Hoc Multiple Comparisons),P<0.05表示差異具有顯著性,P<0.01表示差異具有非常顯著性。
實驗結(jié)果:
8周遞增負(fù)荷跑臺停訓(xùn)不同時相小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活及激活因子的變化均呈先上升后下降趨勢。
?。?)股四頭
5、肌總濕重體重比在停訓(xùn)24h達(dá)到最大值,且非常顯著性增加(P<0.01);
?。?)SC激活活性在停訓(xùn)12h達(dá)到峰值,且非常顯著性增加(P<0.01);
(3)激活因子MyoD蛋白表達(dá)在停訓(xùn)24h達(dá)到峰值,且非常顯著性增加(P<0.01);
?。?)激活因子HGF含量在停訓(xùn)12h達(dá)到峰值,且非常顯著性增加(P<0.01);
?。?)激活因子MGFmRNA的表達(dá)在停訓(xùn)12h達(dá)到峰值,且非常顯著性增加(P<0
6、.01)。
結(jié)論:
(1)從小鼠骨骼肌濕重體重比相關(guān)指標(biāo)分析得出,停訓(xùn)24h此指標(biāo)達(dá)到最大值,之后肌肉濕重體重比呈下降趨勢直至停訓(xùn)7d基本完全恢復(fù);
(2)從小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活角度分析得出,停訓(xùn)12h衛(wèi)星細(xì)胞活性達(dá)到峰值,之后開始降低直至7d基本完全恢復(fù);
(3)從小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活因子動態(tài)變化得出,停訓(xùn)不同時相各激活因子變化趨勢基本相似,停訓(xùn)12-24h期間均達(dá)到峰值,之后均呈下降趨勢。
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