2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩61頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、microRNA(miRNA)是真核生物中一類約22bp大小的的非編碼RNA小分子,通過與靶基因mRNA3'端非翻譯區(qū)特異性的結合而導致靶mRNA的降解或者抑制其翻譯,從而對基因表達進行轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,是一類重要的調(diào)節(jié)因子。microRNA(miRNA)參與的生命過程包括早期發(fā)育、細胞增殖、細胞凋亡及細胞分化等。隨著越來越多microRNA的發(fā)現(xiàn)以及功能與調(diào)節(jié)通路的闡明,microRNA已經(jīng)成為當前生物學領域的研究熱點。研究表明,micro

2、RNA在肌肉發(fā)育過程中也發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。在生物體內(nèi)microRNA的表達具有組織特異性,一些學者把在肌肉中特異表達的microRNA命名為MyomiRs家族,包括miR-1、miR-133a、miR-206等等。MyomiRs的大部分成員在心肌和骨骼肌中都有表達,但是只有miR-206為骨骼肌特異性表達,所以本實驗選擇骨骼肌特異性的miR-206為研究對象。
   本文以原代培養(yǎng)的牛骨骼肌衛(wèi)星細胞為實驗材料,通過Real

3、Time PCR檢測正常培養(yǎng)的牛骨骼肌衛(wèi)星細胞在分化不同時期miR-206的表達量。同時通過轉(zhuǎn)染miR-206的真核表達載體研究miR-206對牛骨骼肌衛(wèi)星細胞分化的影響,結果表明:
   使用膠原酶XI與胰蛋白酶相結合的方法,經(jīng)過差速貼壁成功分離了原代牛骨骼肌衛(wèi)星細胞。細胞生長狀態(tài)良好,在含有2%馬血清的培養(yǎng)基誘導下,細胞能夠分化并融合形成多核的肌管;分化效率較高,免疫熒光染色顯示細胞內(nèi)骨骼肌標志性分子呈陽性表達。
  

4、 實時熒光定量PCR技術驗證miR-206在牛骨骼肌衛(wèi)星細胞分化不同時期呈現(xiàn)出差異表達的情況,在未分化細胞中表達量最低,隨著分化時間的延長其表達量逐漸上調(diào),在第五天表達量為最高。通過轉(zhuǎn)染真核表達載體pcDNA3.1(+)-miR-206與對照組相比,過表達miR-206對牛骨骼肌衛(wèi)星細胞有促進分化的作用。C2C12細胞是體外分化的理想模型,同樣我們檢測其分化不同天數(shù)miR-206的表達情況,實驗結果顯示miR-206的表達水平也是在第

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論