微囊化共培養(yǎng)誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外定向分化新體系的研究.pdf

1、目的：為了更好地模擬體內(nèi)成骨微環(huán)境，建立一種安全的體外誘導(dǎo)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化的新體系，SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與包埋在海藻酸鈉-聚賴(lài)氨酸-海藻酸鈉(alginate-poly-lysine-alginate，APA)微膠囊中的SD大鼠成骨細(xì)胞進(jìn)行體外共培養(yǎng)。
　　 方法：首先利用流式細(xì)胞儀分析了SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的表型，然后進(jìn)行了向成骨、脂肪多向誘導(dǎo)分化鑒定。第3代成骨細(xì)胞被包埋在直徑400微米的APA微膠囊中，之后含有成

2、骨細(xì)胞的微膠囊和外部的干細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，初始成骨細(xì)胞和干細(xì)胞的數(shù)量比約為10:1。共培養(yǎng)之后，通過(guò)堿性磷酸酶(ALP)以及vonKossa染色來(lái)評(píng)價(jià)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞定向分化的程度。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)CD45-和CD29+，并具有向成骨和脂肪的多向分化能力。在體外微囊化共培養(yǎng)數(shù)周后，ALP定性和定量分析以及vonKossa染色證實(shí)微囊化成骨細(xì)胞能夠體外促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞定向分化。<