成年鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞.pdf

1、目前,一系列實(shí)驗(yàn)研究將各種細(xì)胞,包括骨骼肌成肌細(xì)胞、胎兒心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞等,作為移植細(xì)胞被植入心臟,顯示出能明顯提高的心功能.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是全能干細(xì)胞分化而來(lái)的非造血系干細(xì)胞,終身存在于哺乳動(dòng)物的骨髓中,可以分化為心肌細(xì)胞.而且骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞抽取容易,自體骨髓移植后無(wú)免疫排斥反應(yīng).因此,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是自體心肌細(xì)胞移植的一種良好供體.成年大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的體外培養(yǎng)條件及體外定向分

2、化為心肌樣細(xì)胞的可行性是該實(shí)驗(yàn)研究的重點(diǎn).方法:該研究通過(guò)取成年SD大鼠股骨干骨髓,以密度梯度分離法分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng)和傳代,獲得較純的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞.用10μmol/L的5-氮雜胸苷(5-aza)分別對(duì)原代、一代及三代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行體外定向誘導(dǎo),通過(guò)相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,用免疫組化方法分析分化后的細(xì)胞的心肌特異性抗原(肌絲蛋白、肌鈣蛋白)的檢測(cè),并通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)鑒定心肌細(xì)胞特異因子基因