體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞間肝系細(xì)胞定向分化實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞間肝系細(xì)胞定向分化實(shí)驗(yàn)研究姓名：車媛梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：傳染病學(xué)指導(dǎo)教師：張一20060501體外誘導(dǎo)人骨髓問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞向肝系細(xì)胞定向分化實(shí)驗(yàn)研究碩士研究生車媛梅導(dǎo)師張一摘要目的：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymalstemce]ls，MSCs)是一種存在于骨髓內(nèi)的非造血干細(xì)胞，由于其具有自我更新能力及多向分化潛能，在組織器官修復(fù)及再生方面顯示出良好的應(yīng)用前景而倍受研究者關(guān)注

2、。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外培養(yǎng)MSCs，了解其生長(zhǎng)生物學(xué)特性；探討其向肝系細(xì)胞分化的可能性，觀察肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocytegrowthfactorHGF)，堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basiCfibroblastfactorbFGF)及人胎肝細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)的MSCs的誘導(dǎo)作用，尋找影響和調(diào)節(jié)MSCs向刖：細(xì)胞分化的兇素，探討體外誘導(dǎo)培養(yǎng)獲取肌細(xì)胞的可行性以期為臨床肝細(xì)胞移植及生物人上肝治9，提供新的細(xì)胞來(lái)源。方法：1采用密度梯度離心法分離MS

3、Cs，反復(fù)貼擘法純化擴(kuò)增MSCs，鏡下觀察其形念學(xué)特點(diǎn)。2采用膠原酶I型消化法分離人24月胚胎肝臟細(xì)胞，差速貼壁法純化肝臟細(xì)胞后培養(yǎng)。3通過(guò)加入一定濃度生長(zhǎng)因子HGF和bFGF對(duì)MSCs誘導(dǎo)培養(yǎng)，未加入生長(zhǎng)岡了組作為對(duì)照組。觀察誘導(dǎo)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)檢測(cè)誘導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞的甲胎蛋白(alpha—ffetoproteinAFP)、細(xì)胞角蛋白一18(cytokeratin18CK一18)、細(xì)胞角蛋白一19(cytokera