基質細胞衍生因子-1和血小板第4因子對臍帶血干-祖細胞體外擴增及歸巢相關功能的影響研究.pdf

1、造血干細胞移植是治療白血病和淋巴瘤等惡性腫瘤、代謝性疾病、自身免疫性疾病及先天免疫缺陷等嚴重危害人類健康疾病的最有效治療方法之一。臍帶血(UCB)是繼骨髓和動員外周血之后的另一種重要造血干細胞來源，它的優(yōu)點是來源充足、具有很高的增殖和擴增潛能、采集不影響供者、受CMV和Epstein-Barr病毒污染機會小、移植后急慢性GVHD發(fā)生率低于成年供者的骨髓移植、可以建立臍血庫隨時提供移植所需要的HLA相合的干細胞。 體外擴增的HSP

2、Cs是否具有臨床應用價值取決于兩個方面：一、細胞保持增殖和自我更新的能力；二、細胞保持歸巢骨髓造血微環(huán)境的能力。 本實驗室建立了一個具有臨床應用前景的無血清無基質擴增體系：無血清培養(yǎng)基QBSF-60+FST(FL、SCF和TPO)，這一體系可以支持以UCBCD34+細胞為靶細胞的UCB各階段HSPCs高效擴增，而從擴增產物中再次純化CD34+細胞體外生物學特征的研究表明：該擴增體系可使HSPCs保持長期重建造血的潛能，短期體外擴

3、增能夠保持HSPCs歸巢功能。然而，隨著擴增時間延長部分黏附分子(CD54、CD62L、CD31)和趨化因子受體CXCR-4在CD34+細胞上的表達下降，擴增十天以后經擴增后的HSPCs黏附功能和遷移功能也出現了下降。 一、SDF-1和PF4對臍帶血CD34+細胞增殖和擴增的影響SDF-1和PF4都是趨化因子CXC亞家族成員，已有證據表明SDF-1和PF4對造血干細胞生存、增殖有調控作用。本研究在已建立的擴增因子FST組合中加入

4、SDF-1和PF4，應用StemlineTMⅡ無血清培養(yǎng)基建立新的體外擴增方案。 二、SDF-1和PF4對體外擴增后臍帶血CD34+細胞歸巢相關功能的影響擴增后HSPCs在移植受體內重建持久造血的潛能除與其增殖分化及自我更新潛能密切相關，還須具有完整的歸巢功能。歸巢過程包括黏附和遷移，動態(tài)觀察UCBHSPCs在擴增過程中歸巢相關功能及通過優(yōu)化體外擴增方案保持經擴增的UCBHSPCs的歸巢相關功能的研究還很少，對擴增后HSPCs黏

5、附和遷移功能的系統(tǒng)研究無疑為進一步優(yōu)化UCBHSPCs的體外擴增體系和擴增后HSPCs的臨床應用提供實驗依據。 結論本研究采用的無血清培養(yǎng)基StemlineTMⅡ添加早期效應因子組合FST的懸浮培養(yǎng)體系及在此基礎上加入SDF-1和PF4建立的懸浮培養(yǎng)體系，能夠支持UCBHSPCs的持續(xù)有效擴增。在擴增體系中加入SDF-1和PF4能夠保持擴增的CD34+細胞的黏附和遷移能力，有利于降低體外擴增對造血干/祖細胞(HSPCs)歸巢相關功