基質衍生細胞因子-1α誘導內源性細胞歸巢進行牙髓再生的研究.pdf

1、目的：通過在根管內植入基質衍生細胞因子-1α（stromal cell derived factor-1α，SDF-1α）組織學評價根管在皮下異位和頜骨原位兩種不同組織生理學環(huán)境下S DF-1α誘導內源性細胞進入根管的趨化能力，并觀察根管內再生組織的組織學結構，探討SDF-1α誘導內源性細胞歸巢并參與牙髓再生的可行性，為非細胞移植的牙髓再生尋找新途徑。
　　方法：
　　1.皮下異位實驗；臨床收集因正畸需要拔除的前磨牙，制備成

2、長5mm的牙根段，實驗組牙根段根管內植入復合100ng/mL SDF-1α的多肽水凝膠膠原支架，對照組牙根段根管內僅植入多肽水凝膠膠原支架。選取6-8周齡15只免疫缺陷小鼠（裸鼠），背部作一1cm長縱行切口，鈍性分離皮下組織，每只裸鼠背部左右兩側分別各植入一對照組、實驗組牙根段樣本，6周后取材，對樣本進行組織學觀察。
　　2.頜骨原位實驗：選取10-
　　12月齡中華田園犬3只，建立犬恒牙無髓根管模型。每只實驗犬上頜6顆前牙

3、隨機分成兩組，實驗組根管內植入復合100ng/mL SDF-1α的多肽水凝膠膠原支架，對照組根管內僅植入多肽水凝膠膠原支架，冠部均采用MTA+玻璃離子雙層嚴密封閉。術后6周處死動物、取材，蘇木精-伊紅（hematine-eosine，HE）染色及免疫組織化學染色檢測DSPP和CD34在再生組織內的表達情況。
　　結果：
　　1.收集植入裸鼠背部的牙根段樣本，實驗組根管開放端見紅色組織再生，HE染色觀察實驗組牙根段根管內有大量

4、細胞和血管形成，細胞呈長梭形成纖維細胞樣，細胞形態(tài)清晰，胞核小而細長，著色深。根管內見管腔形態(tài)不規(guī)則的血管樣組織形成，內含紅細胞，并可見少量的上皮細胞。
　　對照組牙根段內見均質疏松狀物質，未見細胞、血管等組織結構。
　　2.收集實驗犬實驗樣本，HE染色顯微鏡下可見實驗組根管腔內生成含大量細胞和血管的疏松結締組織。根管內細胞形態(tài)呈長梭形，類似成纖維細胞樣形態(tài)，胞核小而細長，著色深，胞質較少，并貼附于天然牙本質壁。根管內新生血

5、管樣組織可見管腔形態(tài)不規(guī)則，內皮細胞襯于管腔內側。
　　對照組HE染色顯微鏡下觀察根管腔內見均質疏松狀物質，未見細胞、血管等組織結構。
　　DSPP抗體免疫組織化學染色鏡下觀察顯示，實驗組根管內牙髓樣新生組織中細胞胞漿呈棕色陽性表達。
　　CD34抗體免疫組織化學染色鏡下觀察顯示，實驗組根管內血管樣新生組織內襯細胞染色呈棕色陽性表達。
　　結論：
　　1.根管預備后管腔內植入SDF-1α，在皮下異位環(huán)境下S