血小板衍生膜微粒促人臍帶血造血干細胞增殖的實驗研究.pdf

1、目的：研究血小板衍生膜微粒(PMPs)的制備方法，并探討PMPs對人臍帶血造血干細胞增殖能力的影響。 方法：分別采用不同濃度的凝血酶激活血小板釋放出PMPs，采剛流式細胞儀檢測PMPs的釋放量，確定凝血酶最佳實驗濃度。應用掃描電鏡觀察凝血酶激活血小板后PMPs的釋放隋況。采用Ficoll分離人臍帶血單個核細胞(MNCs)，在含有不同濃度PMPs或血小板的甲基纖維素半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，觀察人臍帶血粒一巨噬祖細胞集落(CFU-G

2、M)形成情況，并用流式細胞儀檢測在含P胛s的無血清培養(yǎng)體系中培養(yǎng)7天后人臍帶血MNCs的CD34抗原表達的情況。 結果：用2.0 U/ml、1.5 U/ml、1.0 U/ml和0.5 U/ml凝血酶激活血小板后的PMPs釋放率分別為：28.7﹪、47.7﹪、50.1﹪和43.9﹪；CFU-GM產率與PMPs呈劑量依賴關系，PMPs為10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml和血小板為200×10<'9>/L時的CFU-GM

3、產率(個/2×10<'5>MNCs)分別為：119.8±32.2、142.94±45.2、180.84±85.1和136.5±43,6，50μg/ml、100μg/ml PMPs和200×10<'9>/L血小板組的集落產率與空白對照組(103.0±24.8)相比，P值均<0.05；而10νμg/ml PMPs組的集落產率略高于空白對照組，但兩者無統(tǒng)計學差異，P值>0.05。無血清培養(yǎng)7天后，50μg/ml PMPs組CD34抗原表達率為