新型蛋白酪氨酸激酶抑制劑(ZHT系列化合物)的研究.pdf

1、目的：腫瘤是威脅人類健康的惡性疾病，其發(fā)生多與細胞信號轉導異常密切相關。蛋白酪氨酸激酶通過將蛋白質酪氨酸磷酸化，實現(xiàn)細胞信號的轉導和放大，常在腫瘤細胞中過度表達。本研究在已報道具有蛋白酪氨酸激酶抑制活性的黃酮類結構的基礎上，進行結構修飾，設計并合成了一系列化合物，并對其藥理活性進行初步測定，旨在發(fā)現(xiàn)新的抗腫瘤藥物。
　　 方法：1.通過對不同來源的蛋白酪氨酸激酶進行立體結構的疊合，選取1XKK、1AGW、1PKG、1Y6A、10

2、EC和20J9作為對接受體；基于黃酮類結構設計了一系列小分子結構(代號為ZHT002～ZHT011)，選擇已上市的蛋白酪氨酸激酶抑制劑lapatinib、dasatinib、imatinib、sunitinib、sorafenib和dovitinib作為陽性配體，選擇無抗腫瘤活性的zanamivir、linezolid、aspirin、ritonavir和cephalosporins作為陰性配體。利用計算機輔助藥物設計軟件Gold3.0

3、.1和Glide7.5.112的分子對接方法，計算了小分子配體與受體的結合能力，為確定目標分子提供理論基礎。2.通過化學合成實驗得到目標化合物，以核磁共振進行結構確證。3.在人早幼粒細胞白血病HL-60細胞、人胃腺癌SGC-7901細胞、人結腸癌SW-480細胞和人乳腺癌MCF-7細胞等體外培養(yǎng)的腫瘤細胞株上，采用常規(guī)MTT方法，以細胞生長抑制率及半數(shù)抑制濃度(IC50)為指標初步測定化合物的活性。
　　 結果：1.分子對接結果

4、顯示：陽性配體與各受體對接評分和結合能都較好，大部分ZHT分子與各受體都有很好的結合能力，存在合理的結合模式，但沒有特異性，可能為多靶點酪氨酸激酶抑制劑。2.通過合成得到了10個目標化合物即ZHT002～ZHT011，經(jīng)核磁共振氫譜和碳譜確認結構正確。3.藥理活性測定結果顯示：ZHT009和ZHT010對4種體外培養(yǎng)的人腫瘤細胞株都有較強的增殖抑制作用，IC50都在7.76μg/ml以下。其中ZHT010對人胃腺癌SGC-7901細胞的

5、增殖抑制作用最強，IC50為0.64μg/ml。ZHT009對人早幼粒細胞白血病HL-60細胞、人胃腺癌SGC-7901細胞、人結腸癌SW-480細胞和人乳腺癌MCF-7細胞的IC50分別為3.44、7.16、4.86和7.76μg/ml；ZHT010對人早幼粒細胞白血病HL-60細胞、人胃腺癌SGC-7901細胞、人結腸癌SW-480細胞和人乳腺癌MCF-7細胞的IC50分別為1.58、0.64、2.47和5.22μg/ml；ZHT0

6、01、ZHT005、ZHT007和ZHT011對人早幼粒細胞白血病HL-60細胞有一定增殖抑制作用，IC50分別為27.01、58.55、16.59和21.36μg/ml；ZHT002、ZHT004和ZHT008對此細胞株生長沒有影響。除了ZHT009和ZHT010其它ZHT化合物對人胃腺癌SGC-7901細胞、人結腸癌SW-480細胞和人乳腺癌MCF-7細胞的生長基本沒有影響。
　　 結論：1.基于酪氨酸激酶結構設計并合成的黃