重組人干擾素α2b-胸腺素α1系列融合基因的構(gòu)建表達(dá)及初步功能研究.pdf

1、干擾素α2b是一種多功能的細(xì)胞因子，具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等多種作用。胸腺素α1是一種由28個(gè)氨基酸殘基組成的多肽，具備多種免疫調(diào)節(jié)作用?！　∧壳芭R床上使用的胸腺素α1是一種化學(xué)合成產(chǎn)品，存在著成本高、費(fèi)用大的缺點(diǎn)，限制了該治療方案的應(yīng)用推廣。通過(guò)基因工程方法單純表達(dá)胸腺素α1又存在著一系列的技術(shù)困難，采用基因工程技術(shù)研制重組人干擾素α2b-胸腺素α1的融合蛋白是實(shí)施該治療方案來(lái)源的有效途徑。本研究設(shè)計(jì)、構(gòu)建了一系列的人干擾素α

2、2b和胸腺素α1融合基因。為了盡量避免融合蛋白對(duì)兩個(gè)組成單元的功能造成影響，我們選用了具有高度靈活性和低免疫原性的(G4S)nlinker多肽將兩者相連。本文總共獲得了具備不同長(zhǎng)度的linker三種融合基因，并分別構(gòu)建了三種融合基因的表達(dá)載體，它們都在畢赤酵母pPIC9表達(dá)系統(tǒng)中得到了高水平分泌表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE和Western-blot實(shí)驗(yàn)確證。我們進(jìn)一步通過(guò)離子交換層析和凝膠過(guò)濾層析獲得了三種融合蛋白的純化產(chǎn)品，通過(guò)玫