重組人干擾素α-2b的純化研究.pdf

1、該文系統(tǒng)地介紹了膨脹床吸附分離技術(shù),并研究了其在實(shí)際的生物工程藥物--重組人干擾素α-2b分離純化中的應(yīng)用.1.以溶菌酶為目標(biāo)蛋白,研究了Streamline SP吸附介質(zhì)在膨脹床中的膨脹性能、流體力學(xué)性能以及蛋白質(zhì)在吸附介質(zhì)上的吸附性能,并將膨脹床吸附分離技術(shù)應(yīng)用于卵清純化溶菌酶的實(shí)際過程,結(jié)果表明通過Streamline SP膨脹床一步分離純化,溶菌酶活性收率達(dá)到86.6％,純化因子達(dá)到62.6;2.通過使用疏水性膨脹床介質(zhì)Stre

2、amline phenyl分離純化rHu IFN α-2b,可以有效的分離純化rHu IFN α-2b,去除細(xì)胞碎片;在Streamline phenyl疏水性膨脹床操作的放大過程中,過程中干擾素的活性收率可以達(dá)到80％左右,整個(gè)過程的處理量可以達(dá)到50.4 mgIFN/升介質(zhì);3.應(yīng)用自修飾的Streamline CB膨脹床介質(zhì)提取裂解液中rHu IFN α-2b過程中,在純化rHu IFN α-2b的同時(shí),細(xì)胞碎片被有效的去除,單步

3、純化因子達(dá)到5.0左右,活性收率達(dá)到150％左右;在Streamline CB色素親和膨脹床吸附的放大過程中,過程的處理量為疏水性膨脹床吸附操作的兩倍;4.在色素親和膨脹床吸附操作之后,進(jìn)一步利用離子交換層析和凝膠過濾層析來分離純化rHu IFNα-2b,可以將總純化因子提高到20左右.整個(gè)過程的收率在20％以上.整個(gè)純化過程得到的rHu IFN α-2b的比活在0.6~0.8×10<'8>U/mg,接近純品rHu IFNα-2b的比活