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1、蛋白質(zhì)的賴氨酸乙?;菑募毦秸婧松锒计毡榇嬖诘囊环N翻譯后修飾。幾十年來,研究者們發(fā)現(xiàn)賴氨酸乙?;谡婧松锛毎邪l(fā)揮著許許多多的生物學功能。近幾年,在細菌和古生菌中,也發(fā)現(xiàn)了這種翻譯后修飾的廣泛存在。盡管如此,其在原核細胞中的分布范圍仍然不太清楚,這點也成為了開展原核系統(tǒng)中賴氨酸乙?;揎椆δ苎芯康恼系K。
蛋白質(zhì)的賴氨酸乙?;且环N可逆的修飾,主要由蛋白質(zhì)乙酰轉(zhuǎn)移酶和去乙?;缚刂啤T诩毦?,研究最多的去乙酰化酶是與酵
2、母中沉默信息調(diào)節(jié)蛋白Sir2同源的CobB蛋白。雖然近幾年來有關(guān)CobB蛋白的功能研究取得了一些進展,但其底物和在細菌中的功能仍然不清楚。
首先,我們使用蛋白質(zhì)組芯片技術(shù)篩選到了十五種具有賴氨酸乙?;揎椀牡鞍踪|(zhì),其中的九種可以被大腸桿菌CobB催化去乙?;?,包括N-羥基芳香胺O-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NhoA)。我們使用Western blot驗證了NhoA的確可以被CobB去乙?;?,并結(jié)合質(zhì)譜分析技術(shù)鑒定出NhoA中三個具有可逆
3、的乙?;揎椀馁嚢彼釟埢?。定點突變試驗顯示了其中兩個乙?;嚢彼岬耐蛔儠е翹hoA乙?;降慕档?。進一步的研究發(fā)現(xiàn),NhoA的N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性和O-乙酰轉(zhuǎn)移酶(OAT)活性都會受到這兩個乙?;嚢彼釟埢蛔兊挠绊?。并且,得到了直接的數(shù)據(jù),證實CobB對NhoA的去乙?;饔锰岣吡薔hoA在體外的NAT活性。為了進一步闡明體內(nèi)的賴氨酸乙?;揎棇hoA活性的影響,我們對比了cobB基因敲除菌株與野生型菌株NhoA蛋白的乙
4、?;?,以及對硝基芳香族化合物的誘變敏感性。結(jié)果顯示,cobB基因的敲除會導致NhoA乙?;降奶岣吆蚈AT活性的降低。這些結(jié)果說明,可逆的賴氨酸乙?;揎椩隗w外和體內(nèi)條件下都能夠調(diào)節(jié)NhoA的活性。并且,CobB在體外可以通過催化NhoA的去乙?;岣咂銷AT活性,在體內(nèi),也很可能是通過相同的方式調(diào)節(jié)NhoA的OAT活性。
綜上所述,本研究中我們鑒定到了新的賴氨酸乙?;揎椀牡鞍踪|(zhì)和去乙?;窩obB的底物,發(fā)現(xiàn)了賴
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