大腸桿菌磷酸吡哆醇氧化酶乙酰化位點(diǎn)的突變對酶活性的影響.pdf

1、大腸桿菌磷酸吡哆醇氧化酶催化磷酸吡哆醇和磷酸吡哆胺氧化形成磷酸吡哆醛，該氧化過程以黃素單核苷酸為中間電子受體，氧氣為最終電子受體;該反應(yīng)是大腸桿菌從頭合成磷酸吡哆醛的最后一步，也是大腸桿菌和哺乳細(xì)胞中通過補(bǔ)救途徑合成磷酸吡哆醛的關(guān)鍵一步。乙?；揎椘毡榇嬖谟诎麅?nèi)的關(guān)鍵代謝酶中，近年來的研究結(jié)果顯示乙?；揎椩诩?xì)胞動力學(xué)、細(xì)胞凋亡、能量代謝、蛋白質(zhì)運(yùn)輸和自噬等過程中都發(fā)揮重要作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)室早期蛋白質(zhì)芯片篩選結(jié)果表明，大腸桿

2、菌磷酸吡哆醇氧化酶可能具有乙?；揎椢稽c(diǎn)，通過Western blotting實(shí)驗(yàn)，我們首次確認(rèn)了大腸桿菌磷酸吡哆醇氧化酶的乙?；揎棳F(xiàn)象，通過質(zhì)譜進(jìn)一步的分析，得到了該酶的兩個賴氨酸乙?；揎椢稽c(diǎn)，分別是72和159位。對不同來源的磷酸吡哆醇氧化酶氨基酸序列進(jìn)行多重序列比對后發(fā)現(xiàn)，72位賴氨酸高度保守，159位賴氨酸的保守性較低。對這兩個乙?；揎椢稽c(diǎn)分別進(jìn)行了定點(diǎn)突變，結(jié)果表明72位賴氨酸對于大腸桿菌磷酸吡哆醇氧化酶保持酶活力具有關(guān)