植酸酶基因在畢赤酵母中高效表達及工程菌培養(yǎng)基初步優(yōu)化.pdf

1、植酸酶是催化植酸及植酸鹽水解成肌醇和無機磷酸鹽的一類酶,將其添加到單胃動物植物性飼料中,可以釋放植酸中的無機磷以及被植酸絡(luò)合的Ca<'2+>、Mg<'2+>、Zn<'2+>等礦物元素和一些蛋白質(zhì),從而解除植酸抗?fàn)I養(yǎng)作用、提高動物飼料的營養(yǎng)價值,同時也減少了動物糞便中植酸磷的含量,降低了磷對環(huán)境的污染程度.研究表明,飼料中添加植酸酶可使其中磷利用率提高60％,糞便中磷排出量減少40％,還可以提高飼料轉(zhuǎn)化率,改善動物的生產(chǎn)性能,因此對提高養(yǎng)

2、殖業(yè)的經(jīng)濟效益及環(huán)境保護均具十分重要意義.植酸酶主要存在于微生物和植物中,動物體內(nèi)也有少量存在,但真正具有開發(fā)價值的主要是微生物產(chǎn)生的植酸酶,尤其是曲霉產(chǎn)生的酸性植酸酶.國外早在1991年就成功地利用DNA重組技術(shù)獲得第一株酸性植酸酶的工程菌,并已投入商品化生產(chǎn).目前已開始從事植酸酶的植物和動物基因工程的研究,已成功將植酸酶基因?qū)胲俎！煵?、小鼠和豬的唾液腺中.國內(nèi)對植酸酶的研究起步較晚,到目前為止,植酸酶野生菌株產(chǎn)酶水平低下的問題仍

3、然沒有得到徹底解決,目前市場上應(yīng)用的植酸酶制劑多屬進口產(chǎn)品,且價格昂貴.因此,提高植酸酶野生菌株產(chǎn)酶水平,降低其生產(chǎn)成本,對實現(xiàn)植酸酶產(chǎn)品國產(chǎn)化并獲取自己專利具有十分重要意義.而提高野生菌株產(chǎn)酶水平的主要思路集中在通過基因工程手段克隆植酸酶基因或進行適當(dāng)改造,然后將這些優(yōu)良基因?qū)脒m當(dāng)?shù)乃拗骶?進一步篩選出高產(chǎn)工程菌株,優(yōu)化發(fā)酵工藝條件從而實現(xiàn)植酸酶基因的高效表達.因此,該實驗著力于將已構(gòu)建的可進行誘導(dǎo)調(diào)控分泌表達的畢赤酵母整合型表達載