轉(zhuǎn)錄因子Znhit1在小鼠視網(wǎng)膜上的表達(dá)及其作用研究.pdf

1、目的:
　　眼的發(fā)育及其調(diào)控與整個(gè)機(jī)體的發(fā)育和調(diào)控有著不可分割的聯(lián)系。眼特別是視網(wǎng)膜，是大腦的延伸部分，近30％的大腦的感官輸入起源于視網(wǎng)膜。所以眼的發(fā)育與神經(jīng)系統(tǒng)特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育關(guān)系密切。而視網(wǎng)膜是研究神經(jīng)系統(tǒng)的復(fù)雜特性的理想模型。Znhit1在細(xì)胞周期調(diào)控及細(xì)胞分化等生命過(guò)程中均起到重要作用。但是在視網(wǎng)膜中還未有研究。本課題的研究目的是確定轉(zhuǎn)錄因子Znhit1在小鼠視網(wǎng)膜中的表達(dá)和功能。
　　方法:
　　我

2、們用免疫熒光技術(shù)來(lái)檢測(cè)Znhit1在C57BL/6J小鼠視網(wǎng)膜上的表達(dá)情況。對(duì)于Znhit1的功能實(shí)驗(yàn)，我們采用Cre/loxp方法建立視網(wǎng)膜特異性敲除Znhit1的體內(nèi)研究模型。模型構(gòu)建成功后，用電生理、眼底相干光斷層掃描(OCT)、HE染色等方法檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子Znhit1對(duì)小鼠視網(wǎng)膜的發(fā)育作用。以及通過(guò)TUNEL實(shí)驗(yàn)研究轉(zhuǎn)錄因子Znhit1對(duì)小鼠視網(wǎng)膜的作用機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　1、不同年齡段的C57BL/6J小鼠中，Z

3、nht1表達(dá)于小鼠視網(wǎng)膜中的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)核層及外核層。并且在5wC57BL/6J小鼠視網(wǎng)膜中，已發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、無(wú)長(zhǎng)突細(xì)胞、多巴胺能無(wú)長(zhǎng)突細(xì)胞、膽堿能無(wú)長(zhǎng)突細(xì)胞、Müller細(xì)胞、雙極細(xì)胞、水平細(xì)胞均有表達(dá)。2、5周齡Znht1f/f，ix3-Cre+小鼠視桿系統(tǒng)下降，視錐系統(tǒng)下降。3、相對(duì)于5周齡、7周齡Znht1f/f, Six3-Cre-小鼠，5周齡、7周齡Znhit1f/f,Six3-Cre+小鼠視網(wǎng)膜明顯變薄。4、7周Z

4、nhit1f/+，Six3-Cre+小鼠視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常，但其功能似乎沒(méi)有受到影響。5、P7天Znhit1f/f Six3-Cre+小鼠視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)層次不明顯， P7天Znhit1f/+,Six3-Cre+小鼠視網(wǎng)膜有突起現(xiàn)象。6、在視神經(jīng)周?chē)耙暰W(wǎng)膜中周邊部，Znhit1f/f, Six3-Cre+小鼠比Znhit1f/f,Six3-Cre-小鼠細(xì)胞凋亡數(shù)略多。
　　結(jié)論:
　　以上的數(shù)據(jù)提示轉(zhuǎn)錄因子Znhit1在視網(wǎng)膜的