朊蛋白在阿爾茨海默病和正常小鼠視網膜組織上的表達研究.pdf

1、分類號：密級：UDC：學號：406521412506南昌大學碩士研究生學位論文朊蛋白在阿爾茨海默病和正常小鼠視網膜組織上的朊蛋白在阿爾茨海默病和正常小鼠視網膜組織上的表達研究表達研究ExpressionofprionproteininAlzheimersdiseasenmalmouseretinatissue陳娟培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學第一附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱：周瓊教授主任醫(yī)師申請學位的學科門類：醫(yī)學學科專業(yè)名稱：眼科學論文答

2、辯日期：2015年6月答辯委員會主席：評閱人：2015年6月摘要II摘要目的：目的：通過觀察細胞型朊蛋白(cellularprionproteinPrPc)在阿爾茨海默病(Alzheimer’sdisease，AD)小鼠和正常小鼠視網膜組織上的表達情況，分析PrPc與AD小鼠視網膜組織改變之間存在的關系，為下一步研究PrPc在AD視網膜退行性病變上的發(fā)病機制研究奠定實驗基礎，也為阿爾茨海默病的早期診斷和早期治療提供一定的研究方向。方法：

3、方法：選取6月齡大小的雙轉基因（APPPS1）阿爾茨海默病C57小鼠30只作為實驗組，6月齡大小30只正常健康的C57小鼠作為對照組，雌雄各半，相同的飼養(yǎng)環(huán)境。將小鼠過量麻醉處死后，暴露眼球，分離瞼結膜，剪斷視神經取出眼球，在解剖顯微下迅速的取出視網膜，將視網膜放入EP管內，液氮凍存。首先通過HE染色技術觀察AD小鼠與正常小鼠視網膜組織結構上的差異；免疫熒光檢測PrPc在AD及正常小鼠視網膜組織上的表達情況，共聚焦顯微鏡觀察PrPc的亞

4、細胞定位。通過逆轉錄聚合酶鏈式反應技術(RTPCR)檢測兩組小鼠視網膜組織中PrPc基因的表達差異；蛋白質印跡法(WesternBlotWB)技術檢測兩組小鼠視網膜組織中PrPc蛋白的表達情況，利用上述的兩種實驗方法以βactin作內參因子。分析PrPc在阿爾茨海默病的視網膜組織的病理改變中是否存在作用，對進一步研究PrPc在阿爾茨海默病視網膜病變中的發(fā)病機制提供一定的實驗依據。結果：結果：1.通過對AD小鼠及正常小鼠視網膜組織的HE染

5、色，結果顯示：在視網膜組織結構中，AD小鼠視網膜組織中的內、外核層細胞數量較正常小鼠視網膜組織明顯減少，其視盤盤周神經上皮層厚度較正常小鼠變薄。2.通過對AD小鼠及正常小鼠視網膜組織免疫熒光染色，結果顯示：AD小鼠及正常小鼠視網膜組織中均可見PrPc表達，但是AD小鼠視網膜組織中PrPc的表達明顯強于正常小鼠視網膜組織，其平均光密度值（MOD）比較具有統(tǒng)計學差異（P0.05），PrPc主要分布于視網膜內外叢狀層、光感細胞層及神經節(jié)細胞層