轉(zhuǎn)錄共激活因子TORCs在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷修復(fù)中的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)錄共激活因子TCs在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷修復(fù)中的作用及其機(jī)制研究姓名：王家偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：鄧娟20090510巾山人學(xué)頌l：學(xué)位論文焦顯微鏡觀察TORCs在視網(wǎng)膜的細(xì)胞定位。采用玻璃體內(nèi)注射NMDA激活谷氨酸受體引起RGCs細(xì)胞內(nèi)C∥濃度升高或注射Forskolin升高cAMP濃度觀察TORCs的位置變化。2建立視網(wǎng)膜缺血?jiǎng)游锬Ｐ停芯恳暰W(wǎng)膜缺血再灌注后RGCs中TORCs的亞細(xì)胞定位變化

2、。采用大鼠眼動(dòng)脈結(jié)扎的方法建立急性視網(wǎng)膜缺血模型。我們將成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為兩組，一組為對(duì)照組(3只6眼)，另一組為缺血再灌注組(9只18眼)。缺血再灌注組大鼠結(jié)扎右眼視神經(jīng)鞘內(nèi)的眼動(dòng)脈，缺血60min，隨后松開(kāi)血管夾，造成再灌注；分別于再灌后15min、lh、6h、12h、24h、48h后摘除眼球，固定、切片后行原位雜交、熒光免疫組化，觀察TORCs在RGCs中的亞細(xì)胞定位變化。結(jié)果：RT—PCR和Westernblotting發(fā)

3、現(xiàn)SD大鼠視網(wǎng)膜上有TORCl、TORC2mRNA的表達(dá)，但沒(méi)有檢測(cè)到TORC3的表達(dá)。同TORCl相比，TORC2蛋白的濃度相對(duì)低。在視網(wǎng)膜切片中，TORClmRNA主要表達(dá)在RGCs。靜息狀態(tài)下TORCl主要定位在RGCs的胞漿中，在細(xì)胞核中定位很少。增加細(xì)胞內(nèi)Ca2或CAMP的濃度可以促進(jìn)TORCl入核。在SD大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注15min后均可見(jiàn)到TORCl明顯向核內(nèi)聚集，1h后主要集中在核內(nèi)，6h后大部分又移出細(xì)胞核。對(duì)照組中