5-HTT、NET、BDNF和IDO表達(dá)調(diào)控和皮質(zhì)酮的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　探討皮質(zhì)酮是否通過(guò)其受體介導(dǎo)原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元5-HTT、NET、BDNF和IDO的表達(dá)；探討丙戊酸鈉是否干擾皮質(zhì)酮對(duì)原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元5-HTT、NET、BDNF和IDO的表達(dá)調(diào)控。
　　方法：
　　1.采用孕期為18天的SD胎鼠培養(yǎng)原代海馬神經(jīng)元。免疫組織化學(xué)的方法鑒別海馬神經(jīng)元的純度。
　　2.MTT比色法檢測(cè)皮質(zhì)酮對(duì)海馬神經(jīng)元損傷作用的濃度-效應(yīng)曲線和時(shí)間-效應(yīng)曲線。
　　3

2、.RT-PCR方法和Western-blot法分別檢測(cè)海馬神經(jīng)元5-HTT、NET、BDNF和IDO mRNA及蛋白表達(dá)。
　　4.檢測(cè)皮質(zhì)酮對(duì)海馬神經(jīng)元5-HTT、NET、BDNF和IDO mRNA及蛋白表達(dá)的影響以及這種影響與皮質(zhì)酮受體的關(guān)系。
　　5.檢測(cè)丙戊酸鈉是否干擾皮質(zhì)酮對(duì)海馬神經(jīng)元5-HTT、NET、BDNF和IDO mRNA及蛋白表達(dá)的調(diào)控。
　　結(jié)果：
　　1.原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元純度超過(guò)90％

3、，具有良好的外觀和功能。
　　2.MTT結(jié)果顯示，皮質(zhì)酮呈時(shí)間和濃度依賴性降低海馬神經(jīng)元存活率：5μmol/L的皮質(zhì)酮作用于海馬神經(jīng)元24h和1μmol/L作用48h均顯示細(xì)胞存活率明顯降低。1μml/L以下濃度的皮質(zhì)酮對(duì)原代海馬神經(jīng)元沒(méi)有顯著作用。
　　3.RT-PCR結(jié)果顯示，皮質(zhì)酮能誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元BDNF mRNA表達(dá)顯著降低，IDO mRNA表達(dá)顯著升高。這種升高可以被米非司酮翻轉(zhuǎn)，但丙戊酸鈉對(duì)這種升高無(wú)顯著影響。皮

4、質(zhì)酮對(duì)單胺轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA表達(dá)沒(méi)有顯著性作用。
　　4.Western-blot結(jié)果顯示，皮質(zhì)酮能誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元BDNF表達(dá)顯著降低，IDO表達(dá)顯著升高，這種升高可以被米非司酮翻轉(zhuǎn)，但丙戊酸鈉對(duì)這種升高無(wú)顯著影響。皮質(zhì)酮對(duì)于單胺轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)沒(méi)有顯著性作用。
　　結(jié)論：
　　1.皮質(zhì)酮誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元BDNF表達(dá)降低，IDO表達(dá)的升高，而對(duì)5-HTT和NET的表達(dá)沒(méi)有影響。
　　2.皮質(zhì)酮誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元BDNF表達(dá)降低和