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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分三氧化二砷對(duì)CIA模型大鼠NF-κB信號(hào)的調(diào)控作用
目的:通過(guò)建立膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(CIA)模型大鼠,探討三氧化二砷(AS2O3)抗炎作用及對(duì)NF-κB信號(hào)的調(diào)控機(jī)制。
方法:將60只健康清潔級(jí)Wistar大鼠隨機(jī)分為6組,每組10只,分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、雷公藤對(duì)照組及AS2O3低、中、高劑量治療組,除空白對(duì)照組外,其余各組建立CIA模型,于造模第1天開(kāi)始給藥,連續(xù)用藥4周后用3%烏拉坦腹腔注射麻醉
2、后,股動(dòng)脈取血并分離血清,處死大鼠,剝除后肢膝關(guān)節(jié)皮膚,分離滑膜及關(guān)節(jié)軟骨,蘇木精-伊紅染色法光鏡下觀察關(guān)節(jié)及滑膜的病理改變,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(Elisa)檢測(cè)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素1β(IL-1β)及腫瘤壞死因子α(TNF-α)的表達(dá),免疫印跡雜交法(Western-Blot)檢測(cè)NF-κB信號(hào)蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:
1.成功構(gòu)建了CIA大鼠模型。與空白對(duì)照組比較,模型組關(guān)節(jié)腫脹率明顯升高;各治療組與模型對(duì)照組同一時(shí)間
3、點(diǎn)相比,關(guān)節(jié)腫脹率明顯減輕; AS2O3低、中劑量治療組與雷公藤對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異; AS2O3高劑量治療組關(guān)節(jié)腫脹率低于與雷公藤對(duì)照組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2與空白對(duì)照組相比,模型對(duì)照組IL-1β、TNF-α表達(dá)升高;與模型對(duì)照組相比,各治療組IL-1β、TNF-α表達(dá)均有表達(dá)有不同程度下降,AS2O3高劑量治療組降低最明顯,與雷公藤對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)差異。
3.與空白對(duì)照組相比,模型對(duì)照組NF-κB/P65、N
4、F-κB/P50的蛋白活性升高;各治療組與模型對(duì)照組相比,NF-κB/P65、NF-κB/P50的蛋白活性降低;AS2O3高劑量治療組降低更明顯,與雷公藤對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)論:AS2O3能減輕CIA大鼠關(guān)節(jié)腫脹,降低滑膜淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),下調(diào)血清致炎因子IL-1β、TNF-α的表達(dá)和NF-κB/P65、NF-κB/P50蛋白活性。
第二部分 NF-κB信號(hào)與老年RA患者中醫(yī)證型的相關(guān)性
目的:探討老
5、年類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者炎性活動(dòng)指標(biāo)及核因子kappaB(NF-κB)信號(hào)與中醫(yī)證候分型的相關(guān)性。
方法:收集2014年1月到2014年12月貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院或門(mén)診的60例老年RA患者,根據(jù)中醫(yī)辨證分型標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行辨證分型,并檢測(cè)患者的炎性指標(biāo)C反應(yīng)蛋白(CRP)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)、類風(fēng)濕因子(RF)及NF-κB/P65、NF-κB/P50信號(hào)蛋白的表達(dá)情況,評(píng)價(jià)其與
6、中醫(yī)證型的相關(guān)性。
結(jié)果:
1.NF-κB/P65、NF-κB/P65檢測(cè)結(jié)果顯示濕熱痹阻證表達(dá)水平最高,與寒濕痹阻證、腎氣虛寒證、肝腎陰虛證和瘀血痹阻證比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2.CRP和ESR檢測(cè)結(jié)果以濕熱痹阻型升高最為明顯,與瘀血痹阻證和腎氣虛寒證比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01); CRP檢測(cè)結(jié)果由高到低的順序?yàn)闈駸岜宰枳C>寒濕痹阻證>肝腎陰虛證>腎氣虛寒證>瘀血痹阻證。ESR檢測(cè)結(jié)果由高到低的順序?yàn)闈?/p>
7、熱痹阻證>寒濕痹阻證>肝腎陰虛證>瘀血痹阻證>腎氣虛寒證。
3.抗CCP抗體檢測(cè)結(jié)果以濕熱痹阻證為最高,與寒濕痹阻證、腎氣虛寒證、肝腎陰虛證、瘀血痹阻證比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;抗CCP檢測(cè)結(jié)果由高到低排列為濕熱痹阻證>瘀血痹阻證>肝腎陰虛證>寒濕痹阻證>腎氣虛寒證。
4.RFIgM、RFIgG檢測(cè)結(jié)果以濕熱痹阻證升高最為明顯,與寒濕痹阻證、瘀血痹阻證比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;RFIgA檢測(cè)結(jié)果在各證型間兩兩比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。<
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