2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、TEV蛋白酶(tobacco etch virus protease)是煙草蝕斑病毒編碼的NIa蛋白中27 KD的催化區(qū)域。由于它能特異性識(shí)別含有6個(gè)氨基酸(ENLYFQ)特定序列的蛋白,并進(jìn)行酶切,酶切活性較高,且酶切的條件具有寬容性。因此在重組蛋白領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。
  本實(shí)驗(yàn)室依據(jù)大腸桿菌偏愛(ài)密碼子和TEV的基因序列,通過(guò)重疊PCR的方法成功克隆了TEV基因。目前對(duì)TEV酶的研究主要集中在通過(guò)不同的方法提高TEV酶的表達(dá)量、精

2、確的活性分析以及對(duì)TEV酶進(jìn)行固定化,其中對(duì)于TEV酶的活性檢測(cè)大部分是通過(guò)半定量進(jìn)行分析,即通過(guò)酶切后蛋白的SDS-PAGE上條帶的大小和結(jié)合蛋白濃度分析軟件進(jìn)行分析。
  本實(shí)驗(yàn)通過(guò)構(gòu)建 pET28b-MBP-his-TEV、 pET28b-MBP-his-ACP-TEV、pET28b-MBP-ybbR-his-TEV重組載體,成功表達(dá)和純化出目的蛋白,并且通過(guò)酶活分析發(fā)現(xiàn)ACP蛋白和ybbR短肽對(duì)TEV酶的活性有促進(jìn)作用,其

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