TRIM44在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的作用研究.pdf

1、背景：TRIM44（Tripartite motif-44）是TRIM家族的一員，在神經(jīng)元的分化和成熟過程中起著重要的作用。已有研究發(fā)現(xiàn)在胃食管癌和乳腺癌患者中，TRIM44過表達(dá)的腫瘤具有更強(qiáng)的侵襲能力，作用機(jī)制可能與其泛素特異性蛋白酶（USP）樣作用有關(guān)。同時(shí)，TRIM44在小鼠大腦的海馬區(qū)部位呈現(xiàn)過表達(dá)狀態(tài)，提示TRIM44在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中可能也具有重要作用。
　　目的：檢測(cè)TRIM44基因在人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中的表達(dá)情況

2、，觀察敲降TRIM44后膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞相關(guān)功能的改變。初步探討TRIM44在人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的作用及其相關(guān)機(jī)制，以期闡明TRIM44可否作為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤治療中的靶點(diǎn)和預(yù)后標(biāo)志物。
　　方法：運(yùn)用Real-time PCR技術(shù)對(duì)TRIM44基因在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。構(gòu)建TRIM44-shRNA慢病毒載體，通過沉默TRIM44后，檢測(cè)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞在增殖、克隆形成、遷移、凋亡等功能方面改變，結(jié)合雙熒光素酶報(bào)告基

3、因系統(tǒng)初步探索TRIM44在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤發(fā)生發(fā)展中可能的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：在人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中，TRIM44的表達(dá)量高于其在正常細(xì)胞系中的表達(dá)水平。TRIM44-shRNA慢病毒感染人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞，沉默TRIM44基因的表達(dá)后，可使腫瘤細(xì)胞增殖率、克隆形成率明顯減少，細(xì)胞遷移能力也明顯受損，并且流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示腫瘤細(xì)胞凋亡率增加。TCGA在線數(shù)據(jù)庫顯示在160例人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤臨床樣本中有98例TRIM44基因發(fā)生

4、融合(約61.25％)。雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果顯示對(duì)照組（plenti-utr-luc-blank）熒光素酶強(qiáng)度是實(shí)驗(yàn)組(TRIM443'UTR Lenti-reporter-Luc)的2.5倍左右。
　　結(jié)論：TRIM44在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中發(fā)揮著致癌基因作用，沉默TRIM44可損害膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的增殖、遷移及克隆形成能力。初步發(fā)現(xiàn)TRIM44可作為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤基因治療的候選基因，同時(shí)也為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者的個(gè)體化治療提供了新線