RHAMM和CD44在髓母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其與白藜蘆醇抗髓母細(xì)胞瘤作用的關(guān)系.pdf

1、目的：1)觀察透明質(zhì)酸受體RHAMM和CD44在人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系UW228-2和-3和腫瘤組織中的表達(dá)情況：2)探討白藜蘆醇在抗髓母細(xì)胞瘤作用中對RHAMM和CD44基因表達(dá)的影響：3)研究RHAMM和CD44在白藜蘆醇誘導(dǎo)髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化、凋亡及細(xì)胞周期阻滯中所發(fā)揮的作用：4)分析RHAMM和CD44與髓母細(xì)胞瘤高度侵襲性的相關(guān)性。 方法：人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系UW228-2和-3培養(yǎng)于含有10﹪胎牛血清的DMEM(Dulbe

2、cco's Modified Eagle's Medium)培養(yǎng)基中，100μM白藜蘆醇(resveratrol，Res)處理細(xì)胞48小時后用于細(xì)胞形態(tài)觀察和免疫細(xì)胞化學(xué)染色：制備細(xì)胞懸液并離心沉淀用于RNA和蛋白質(zhì)的提取：采用RT-PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光和Western-Blot等方法分析白藜蘆醇處理前后UW228-2和-3中RHAMM和CD44在核酸和蛋白質(zhì)水平以及在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。對來自臨床的11例髓母細(xì)胞瘤和其對應(yīng)的瘤

3、旁相對正常小腦組織的石蠟包埋標(biāo)本，利用自行研制的組織微陣列儀制成石蠟組織微陣列，而后進(jìn)行RHAMM的免疫組織化學(xué)染色，觀察其在髓母細(xì)胞瘤及其對應(yīng)的瘤旁相對正常腦組織中的表達(dá)情況。 結(jié)果：1)RHAMM在髓母細(xì)胞瘤組織及瘤旁相對正常腦組織中均有分布，未觀察到明顯差別；2)白藜蘆醇處理前后的髓母細(xì)胞瘤UW228-2和-3 細(xì)胞系中，RHAMM的表達(dá)在mRNA和蛋白水平上均未見明顯改變：3)在胞漿及胞核中均可見到RHAMM的分布，且

4、胞漿中以與微管蛋白相結(jié)合形式存在：4)CD44s在上述兩個細(xì)胞系中均有表達(dá)，但未檢測到CD44v的存在；5)CD44s在白藜蘆醇處理前后的的兩個細(xì)胞系中未見明顯變化。 結(jié)論：1)RHAMM在髓母細(xì)胞瘤組織及瘤旁相對正常腦組織中表達(dá)一致，提示RHAMM在髓母細(xì)胞瘤高度侵襲性的生物學(xué)行為中可能不起關(guān)鍵作用：2)白藜蘆醇誘導(dǎo)的髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化、凋亡及周期阻滯與RHAMM可能無直接關(guān)系； 3)RHAMM在正常神經(jīng)細(xì)胞及腫瘤細(xì)