蠟梅小GTP結(jié)合蛋白基因CpRAC1的克隆及功能初步驗證.pdf

1、獨創(chuàng)性聲明學(xué)位論文題目：蟥整d ：魚! 里坌僉蛋白基因￡幽旦鮑直隆丞邊韭初步驗證本人提交的學(xué)位論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。論文中引用他人已經(jīng)發(fā)表或出版過的研究成果，文中已加了特別標(biāo)注。對本研究及學(xué)位論文撰寫曾做出貢獻的老師、朋友、同仁在文中作了明確說明并表示衷心感謝。學(xué)位論文作者： - 11 約土嘶 簽字日期： 少J 年 ‘月二日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解西南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)

2、保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)西南大學(xué)研究生院( 籌) 可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。( 保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書，本論文：日不保密，口保密期限至 年 月止) 。學(xué)位論文作者簽名：j ] 鈞主季導(dǎo)師簽名：多h 妙簽字日期： > 。廳年‘月 2 日 簽字日期：∥細膨年／月2 日西南大學(xué)碩士學(xué)位淪文

3、3 ．2 ．2 蠟梅C p R A C l 基因c D N A 序列的獲得????????????．1 93 ．2 ．3 蠟梅C p R A C l 基因的生物信息學(xué)分析????????????一2 23 ．3 結(jié)果與分析??????????????????????????2 23 ．3 ．1 蠟梅( 力刪C ，基因c D N A 的獲得及其序列特征????????．2 23 ．3 ．2 蠟梅@ R A C J 基因編碼蛋白的基本特征預(yù)

4、測分析???????一2 43 ．3 ．3 蠟梅C p R A C l 基因編碼蛋白的同源性分析??????????．．2 53 。3 ．4 蠟梅@ R A C l 基因編碼蛋白的聚類分析???????????．．2 63 ．3 ．5 蠟梅C p R A C l 蛋白與擬南芥R A C 蛋白的聚類分析與多重序列比對?．2 83 ．4 討論?????????????????????????????2 9第四章蠟梅C p R A C l 基

5、因的表達特性分析???????????????．3 14 ．1 實驗材料???????????????????????????3 l4 ．2 實驗方法???????????????????????????3 14 ．2 ．1 蠟梅不同組織、不同時期及不同脅迫處理材料的采集?????．3 14 ．2 ．2 總R N A 的提取及c D N A 第一鏈的獲得???????????．．3 24 ．2 ．3C p R A C I 基因表達特性的

6、實時熒光定量分析?????????．．3 24 ．3 結(jié)果與分析?????????????????????????．3 44 ．3 ．1 蠟梅總R N A 提取????????????????????．．3 44 ．3 ．2C 匆魁C ，基因的表達特性分析????????????????3 44 ．4 討{ 侖??????????????????????????????????????．．4 0第五章蠟梅c ≯肌c J 基因表達載體的構(gòu)

7、建及擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化研究??????4 15 ．1 實驗材料???????????????????????????4 15 ．1 。1 植物材料????????????????????????一4 15 ．1 ．2 載體及菌株???????????????????????．4 15 ．1 ．3 試劑盒及主要試劑????????????????????．4 l5 ．1 ．4 自配的主要試劑?????????????????????．4 15

8、 ．2 實驗方法???????????????????????????4 25 ．2 ．1 蠟梅C p R A C l 基因植物超表達載體的構(gòu)建??????????．4 25 ．2 ．2 農(nóng)桿菌E H A l 0 5 凍融法感受態(tài)的制備????????????．4 45 ．2 ．3 凍融法轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌E H A l 0 5 感受態(tài)細胞???????????一4 45 ．2 _ 4 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化子的P C R 鑒定及反轉(zhuǎn)化大腸桿菌鑒定????